贝壳里的海
第1楼2009/12/31
我用四氢呋喃溶解高分子样品做GPC,做出来的图谱如下面所示:那些右边的高高低低的峰是溶剂产生的么?还是有可能是高分子当中含有一些低分子量的东西?有什么方法可以判断呀?
纵坐标是等效于什么呢?是不是可以理解为某一个分子量对应的浓度呢?
右边的高高低低的峰不容易判断的,溶剂峰和低分子量物质都有可能。GPC一般用来制备或者净化用,好像不能准确定性和定量,因为其分辨率,灵敏度都不够。想要判断那些峰到底是什么,你可以按照保留时间,把那些物质收集浓缩,然后放到LC-MSMS上进行确认,扫描其分子量,先判断是不是溶剂,如果不是,再去判断是哪种低分子量的物质。
纵坐标,一般都是吸光值,GPC其实就是粗糙一点的液相色谱。在某种程度上,纵坐标可以理解为某一个分子量对应的浓度,但是看你怎么应用了。因为这里的一个峰很可能不是一种物质,有可能是几种,或者更多种物质形成的一个峰形状的大包,因为GPC分辨率等达不到,分离不开。
tigertooth
第6楼2010/01/05
最右边的那个峰叫溶剂峰,但不一定都是溶剂造成的,它是由你进的那一针样品中最小分子量的东西造成的;既有溶剂的也有样品的。
确定它的最好方法我认为是用废液管流出的干净流动相配制你的样品进样,也就是像你进样前,平衡柱子流出的THF。但你的样品要非常好溶解,基本上可以滴进THF后就能溶解进样,因为THF很容易吸水、产生过氧化物。进样后,产生的溶剂峰基本上就是你的样品中小分子的部分产生的了。
THF体系一般用的是聚苯乙烯(PS)标样。至于线性宽与窄你要问做实验的人,但应该不是很宽。因为你的样品起峰为16min左右,而标准曲线的最大的分子量保留时间也为16分钟左右。
zhz1285
第8楼2010/01/05
首先纠正二楼的一点,就是GPC的检测器问题,GPC用的是RID,是指示差折光检测器。纵坐标不是吸光值,是样品的折光率与溶剂折光率的差,然后经信号转换系统与数据处理系统显示在谱图上,与UV有根本的不同!
其次,楼主的谱图最后面的峰应该是溶剂峰,如果有其它溶剂,峰不会那么尖锐,会有较高的响应值!另外,GPC在进样是会进少量的空气,水,和二氧化碳,所以会显示倒峰,而且一般会连续有三个!楼主的谱图最后尖峰前面的很小的峰有可能是低分子量的物质或很少量的溶剂!
最后,楼主给出的标准曲线的谱图是九个点,不过最初高分子量(数均分子量在六百万左右)的几个点不是很好,不知道楼主的样品分子量在多少:)!