【求助】请问total internal reflection fluorescence (TIRF) microscopy 是什么？

全内角反射荧光显微镜（total internal reflection fluorescence microscope，TIRFM），利用光线全反射后在介质另一面产生衰逝波的特性，激发荧光分子以观察荧光标定样品的极薄区域，观测的动态范围通常在200 nm以下。因为激发光呈指数衰减的特性，只有极靠近全反射面的样本区域会产生荧光反射，大大降低了背景光噪声干扰观测标的，故此项技术广泛应用于细胞表面物质的动态观察。

谢谢vnavan的帮助，请问用这种显微镜的样品需要做处理吗？还是和用一般的荧光显微镜一样？

期待高手们的救助

荧光显微镜一般都是一样的，只是激发组不一样（紫外光 、紫光 、蓝光 和绿光 )，一般荧光显微镜的激发组就这四个配置，只是样品在荧光上观察一旦时间，样品的荧光效果就会减弱。

谢谢啊庆，请问荧光效果的减弱是因为细胞的原因，还是荧光照射后会衰减？