微雨燕双飞
第10楼2010/02/27
液相色谱柱分类:
1.按照分离规模分类:毛细管柱、微径柱、分析柱、制备柱,从前往后色谱柱内径和载样量逐渐增大;可以知道我们选择合适的柱子以适用不同的样品量;
2.按照固定相与样品之间的物理化学作用分类:
a.分配作用(Partition)色谱:化合物的分离基于不同组分在两相间分配系数(Kp)的差异;比如C18
b.吸附(adsorption)色谱:依据固体吸附剂表面的极性基团对不同化合物吸附强弱进行分离;比如Silica
c.离子交换(ion exchange)色谱:填料上的离子基团与化合物上的反离子间存在库伦力,依据吸附剂与不同化合物库伦力的差别进行分离;比如SCX、SAX;
d.尺寸排阻(size exclution)色谱:填料为网状凝胶,存在尺寸不同的孔隙,不同分子量的化合物流经色谱柱通过的路径不同从而被分离,填料与化合物见基本不存在作用力;GPC、GFC
e.亲和色谱:不熟悉;
f.手性(chiral)色谱:依据具有特定空间形态的固定相对对应异构体保留的差别进行分离;比如直链淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯);
这种分类对方法建立具有举足轻重的作用;
3.依据固定相的存在形态分类:平面色谱(包括纸色谱和薄层色谱,不属于HPLC)、柱色谱;该分类不符合楼主要求,但方便大家了解液相色谱法;
4.依据吸附剂材质分类:硅胶基质(硅胶键合相,目前最常用的一种形式)、杂化颗粒(比如X-bridge系列)、聚合物基质(PLRP、所有的凝胶柱)、无机颗粒;多种材质拓宽了分析方法的pH适用范围;
5.依据固定相的存在形式:涂渍型色谱(早期的液液色谱、目前的大多数手性柱)、键合相色谱;
6.依据固定相的存在形态:液液色谱、液固色谱;
反相色谱法和正相色谱法是色谱法早期提出的,当时硅胶键合相尚未被发明,液相色谱填料类似气相中的填充柱,固定液被涂渍在载体上,固定液与载体间仅存在微弱的分子间作用力,流动相会不断的把固定液洗脱导致柱流失,为减小柱流失,研究者给出了多种固定液和多种溶剂的极性,并建议分析时固定液与流动相的极性需具有一定的差异以减小它们的互容性,流动相的极性大于固定相时,称为反相色谱(RP),反之称为正相色谱(NP)。随着键合相的出现,这种分类法已经不能覆盖分配色谱和吸附色谱以外的色谱法,但这种分类法对方法建立仍有一定的作用,而且分析工作者已经习惯这种叫法,而且反相色谱仍是应用最广的色谱法,所以至今仍在广泛使用。反相色谱柱通常包括ODS、C8、PH、C4等,正相色谱柱通常包括Silica、NH2;CN既属于反相又属于正相,具体要看流动相极性。
以上随记随写的,难保没有错误尤其是一些单词,如有谬误请斧正,不胜感激
色谱柱技术持续发展,分类法也会不断改进,只要明白原理为我所用,不必拘泥形式。