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【原创】急急!! 检测器响应值与设定的波长有关吗

  • yufang_1234
    2010/03/03
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我用的是安捷伦1200的 我用仪器检测出我的样品的最大吸收在194nm 还有次吸收246nm(很小 不是太明显) 这样肯定是用246nm对吧 可是我测量时发现我测的产品在225nm的响应值却比在246nm的响应值高,测时使用的浓度是一样的 我想问的是我到底要用哪个波长啊?是不是最大吸收波长时的响应值应该最大???请大家快来帮帮忙吧
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  • isomer

    第1楼2010/03/03

    你好,新手版的帖子不会在最新1000帖显示的,看到的人很少,所以下次记得发到相关版面去。

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  • 微雨燕双飞

    第2楼2010/03/03

    帮您解决了。
    使用HPLC-UV分析时,建立一个方法首先要对化合物进行光谱扫描,了解它在紫外-可见区的吸收情况,如您所说,它在194 nm和246 nm有两个吸收峰,通常情况下应选择吸收峰处的波长作为液相的检测波长,然而194 nm属于远紫外区,大多数化合物包括流动相在这里都有较高吸收(至于为什么,这涉及到分子结构以及价键跃迁,我就不细说了),基线噪声和漂移严重,分析灵敏度反而不高,所以应选择其他波长。但242 nm未必是您最佳的选择,因为其他波长虽不是吸收峰,但某些波长下的吸收未必就比242 nm低,比如拿泰山和珠穆朗玛峰比,虽然泰山是山峰,但珠穆朗玛峰的山腰未必比泰山低。所以225 nm虽不是吸收峰,但它照样可以比242 nm的吸收高。选择波长不能单纯地看吸收强度,同时还要考虑基线噪声的高低。通常情况下,您可以从205~242 nm之间5 nm低增大,分别分析(恒定其他一切条件),计算信噪比(S/N),信噪比最高的那个波长就可以作为测试波长。以后分析时也如此。当然化合物所有吸收峰处于230 nm以上时可以不必如此。

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  • 该帖子已被版主-有水有渝加2积分,加2经验;加分理由:解释的很详细
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  • 有水有渝

    第3楼2010/03/03

    应助达人

    做一个波长扫描,什么都看的清清楚楚的。

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  • 微雨燕双飞

    第4楼2010/03/03

    波长扫描是必做的,但波长较低时若想找出最佳的分析灵敏度还是要还是得计算S/N。

    xky0230699(xky0230699) 发表:做一个波长扫描,什么都看的清清楚楚的。

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