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【我侃药典】关于薄层扫描定量双波长法两个波长点的选择问题的讨论

睿武孝文

2010/04/07

薄层色谱（TLC）

以下的话均为本人实验过程中的切身体会，或许有不少错误，敬请各位专家不吝赐教！
所谓的双波长：一个样品波长λs，一个参比波长λR。
在选择这两个波长点时，一般是先做光谱扫描，对斑点和空白区域进行光谱扫描。这样会出现两个光谱图。
我的认识是最好是λR处斑点和空白的吸光度值重合，即吸光度值是一样的；而在λs处，斑点最好适合地大于空白的吸光度值。这样在做色谱扫描时，先以λR扫描时，色谱基线会是一条比较平稳的直线；以λs扫描时，到斑点处会显示良好的吸收峰。
这是我对双波长的理解。
但请大家看中国药典2005年版一部363页，关于元胡止痛片中延胡索乙素的薄扫含量测定，其两个波长分别是346nm和200nm，我对200nm存在较大的疑惑，200nm是一个临界点，能用吗？反正我们在做实验时，这两个波长是不合适的。

分
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小卢

第1楼2010/04/22

我原来也用过，当时的情况是，一个波长1用来扣除，做背景，一个波长2用来检测。
当时不是很理解，现在我想想，目的应该是：在波长2下检测时，会出现部分杂质，而这部分杂质在波长1处能检测到，因此在波长2检测下扣除在波长1处的检查，也就是把波长1作为空白来用啦。

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