齐墩果酸保留时间大转移(第一天)
lingshike
第1楼2010/04/18
齐墩果酸保留时间大转移(第二天)
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第2楼2010/04/18
齐墩果酸保留时间大转移(第三天)
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第3楼2010/04/18
到了这针,事情发生了转机。我仔细了看了前面两天和今天的记录,心里想不可能啊,怎么会怎么乱?!无意间,我闪过一个念头,会不会是我流动相不合适,虽然相同的条件,别人做的出来,但是我的柱子不一样啊,上一针的峰,残留到了下一针,更或者是下下针呢?于是马上进行计算。
前面两天和今天所有的峰都是连续进的,时间是连续的。假设所有的对照品进样都有较大的峰出现,那么今天第一针对照品的峰(图16),应该就是到了第三针里面(图18)的32min。那么它的保留时间就是,今天第一针的分析时间,加上第二针的分析时间,再加上第三针出峰的32min。结果就是:35+28+32=95min。按照这个时间,推算第二针对照品的峰应该是在第四针的30min左右(95-28-42=30),结果是在第四针的27min出了一个峰(图19)。那第三针对照品的峰应该是在第五针的9min左右(95-42-44=9),结果确实是在第五针的9分针出了一个峰!(图20)。以此类推,今天所做对照品都可以找到对应的峰。为再次证实推论的正确,再次进样新齐墩果酸对照品(0.656mg/ml),图谱如下:
图22
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第5楼2010/04/18
通过这个试验,我进行总结如下:
1. 试验一开始就错了,后面跟着错了两天,应该在对照品没有出峰的情况下,马上调流动相。一般对照品是不可能不出峰的。
2. 试验流动相得调整,应该从极性小开始往极性大调(C18柱)。(这一点,我们论坛里面早就有了,可惜,我没有看到,zxhcnf等高手早这么做了。 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100107/2326822/)
3. 齐墩果酸和熊果酸是同分异构体,液相分离很难。就算偶尔可以分开,重复性也是很差。我遇到过的人都说很难很难。这一点,不知道大家有什么经验没有,可以讨论讨论。
4. 这个试验中,我们用了月旭XB-C18,5μm,4.6*250mm,伊利特ODS2,5μm,4.6*250mm,两根柱子,从保留时间和柱压来看,月旭XB-C18均大于伊利特ODS(保留时间,月旭75-81min,伊利特ODS 40min;柱压,旧月旭153bar,新月旭柱120bar,伊利特ODS108bar。)这个说明月旭柱的填料确实很结实。从分离效果来看,齐墩果酸和熊果酸两根柱子都没有分开,不过这个本来就是一个分离难题。
5. 因为月旭柱填料比较结实,在查阅文献的资料中,要注意柱子的厂家型号,如果要用月旭柱重现文献的图谱,建议流动相的极性要小于文献记载(C18柱)。