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【求助】求助:HPLC,保留时间不稳定?

液相色谱(LC)

  • 各位朋友好
    目前在做油酸的高效液相方法建立,可是选定的色谱条件下保留时间极其不稳定,同样的样品,两针之间差别都较大(前后进4针,用时大约2 h,保留时间由6.539变到5.868 min),请教有做过的吗,请高人来给分析下,先行谢过。
    色谱条件:乙腈:水=8:2;流速:2ml/min;柱温:20度;波长:205 nm;色谱柱:C18.
    谢谢。
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  • micalezhang

    第1楼2010/04/26

    你的流动相比较简单,应该没有什么问题。保留时间和流速,柱温,流动相,柱子有关,先检查你的流速是否准确大概可以看压力变化可以判断。柱温20度我觉得是个问题,室温可能对柱温有影响。柱子是否正常,好好冲洗冲洗。

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  • xue2009

    第2楼2010/04/26

    流速大啦,建议减小流速

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  • xuyuan924

    第3楼2010/04/26

    泵的压力不稳 柱子 管道检查一片侃侃

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  • lwjxzj

    第4楼2010/04/26

    在测定过程中压力还是比较稳定的,柱子也经过了长时间的冲洗,我们的实验是一次进样测定三种物质,其它两种都很稳定,就是油酸的保留时间差别大。20度的温度是柱温箱控制的,应该也是比较准吧。
    nancy7752,仪器是Agilent 1100,流动相是配置好走的等度而非在线混合,流速的重复性我要在测定一下。
    谢谢

    micalezhang(micalezhang) 发表:你的流动相比较简单,应该没有什么问题。保留时间和流速,柱温,流动相,柱子有关,先检查你的流速是否准确大概可以看压力变化可以判断。柱温20度我觉得是个问题,室温可能对柱温有影响。柱子是否正常,好好冲洗冲洗。

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  • fanchuangang

    第5楼2010/04/26

    可能出在流动相上,流速稳定性差了点

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  • 〓猪哥哥〓

    第6楼2010/04/26

    跟外界室温变化也有关系

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  • 有水有渝

    第7楼2010/04/26

    应助达人

    用磷酸把流动相调节到PH3.0以下试试。

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  • liulinwen

    第8楼2010/04/27

    与物质本身的性质有关,有些酸性物质或碱性物质会出现保留时间变化较大的情况,可能是分子结构中的羟基的影响吧

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  • yukepotato

    第9楼2010/04/27

    你用2的流速柱压是多少啊?
    柱温的话可以用柱温箱控制,我之前做样时,也发生过保留时间相差大,是因为我的条件是25度,没装柱温箱!

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  • arthurinsz

    第10楼2010/04/27

    我以前也碰到过类似的情况,不知道如何解决。

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