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【荧光探针试剂一】荧光素

pfz1985

2010/06/13

荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多
目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种。

1．异硫氰酸荧光素

　　(fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。有两种异构体，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与蛋白质结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素。其主要优点是人眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。

2．四乙基罗丹明

　　(rhodamine, RB200) RB200为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮，性质稳定，可长期保存。最大吸收光波长为 570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈现橘红色荧光。

3．四甲基异硫氰酸罗丹明

　　(tetramethyl rhodamine isothiocynate, TRITC) TRITC为罗丹明的衍生物，呈紫红色粉末，较稳定。最大吸收光波长为 550nm，最大发射光波长为620nm，呈现橙红色荧光，与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢，也可用于单独标记染色。

4．酶作用后产生荧光的物质

　　某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如，4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性磷酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。 5．镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕 (Eu3+)、铽 (Tb3+) 等的螯合物可发射特征性的荧光，而且激发光波长范围宽、发射光波长范围窄、荧光衰变时间长，最适合于时间分辨荧光免疫测定。

分
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工农兵

第1楼2010/06/15

日常工作中，涉及荧光素不多。大家学习一下，还是好的。

0

huangza

第2楼2011/02/24

应助达人

在荧光素的配制过程中，有哪些需要注意的呢，所使用的玻璃器皿有什么特殊的要求没有？还有保存条件？

0

wlx8907

第3楼2011/07/28

你好，我想问下，异硫氰酸荧光素这种荧光素有两种异构体的吧，不知道这两种异构体在结构、用途、性质上有什么不同，最近在学习这方面知识，还望有高人指点。谢谢！

0

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