【求助】液相检测，柱子问题？

应助达人

样品和对照品的溶剂都一样吗，都是用流动相溶解的？是不是样品溶液对PH的影响比较大或样品中存在与主成分保留时间相似的物质。

样品和对照品的溶剂都一样的，和流动相成分一样,

很有可能是样品的PH值没有调节正确，对照品出峰正常说明柱子没问题

应助达人

换几个ＰＨ看看，当然不要超出色谱柱的使用范围，色谱柱的维护说明书中肯定有说明，如果没有还是咨询厂家色谱柱工程师为好。

对照品存放时间 是否过长？流动相重新配置再进样查看下

TSK sw系列的柱子适合蛋白质的分离，你的样品为糖蛋白，既有蛋白又有糖的性质，所以分离不好，蛋白肯定没问题。这其实与用PW分离蛋白是一样的，都会有拖尾。所以你只能改变流动相试一试。

稍微的改变下流动相，也可以考虑减少进样体积，进5ul试试看。

先咨询厂家看看了，柱子是没有问题，可能得调整一下PH值。

1、减少进样量
2、略微调整一下PH，你的样品的PKa是4.5--5.5。可调PH为8.0试试