【资料】EX1600HPLC的应用：DLPME-HPLC同时测定微量人血清中的维生素A和E

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2010/07/02

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EX1600 典型应用

《现代预防医学》 2009 36（1）
DLPME-HPLC同时测定微量人血清中的维生素A和E

摘要：[目的]建立了人血清中维生素A和E的分散液相微萃取（dispersive liquid phasemicroextraction，DLPME）- 高效液相色谱分析方法。[方法] 取血清20μl，加入50μl甲醇，漩涡震荡10s后加50μl三氯甲烷超声萃取，高速离心后吸取下层三氯甲烷层供高效液相色谱分析，标准曲线法定量。色谱分析条件为：色谱柱为Eclipse XDB - C₈ （150 mm × 4.6 mm，5μm）；流动相为甲醇-水（96+4）；流速为0.80 ml/min ；柱温为25℃；紫外检测波长：维生素A为325nm，维生素E为292nm。[结果]维生素A和E标准曲线的相关系数均大于0.999；相对标准偏差均小于5%。对于20μl血清，本法的检出限维生素A为0.035μg∕ml；维生素E为0.09μg∕ml。维生素A和E 的加标回收率分别为90.4%～103.2%和81.0%～92.1%。[结论] 本法灵敏、准确、快速、简便，节约有机溶剂，适合于血清中维生素A和E的快速测定，是环境友好型的绿色分析方法。

关键词：分散液相微萃取；维生素A；维生素E；高效液相色谱；血清

仪器与试剂高效液相色谱仪（EX1600，上海伍丰科学仪器有限公司）,带紫外检测器（EX1600UV）；C₈柱（Eclipse XDB-C₈，4.6 mm × 15 cm，5.0μm），同类型保护柱；WH-1微型漩涡混合仪；台式高速离心机（AnkeTGL-16B）；超声波清洗器(KQ-250型)。维生素A（视黄醇）标准品（FLUKA，>99％）；维生素E标准品（Sigma，>95%）；三氯甲烷（色谱纯）；甲醇（色谱纯）；维生素A 标准储备液（1mg/ml）：甲醇配制，于-20℃冰箱冷藏保存；维生素E 标准储备液（2mg/ml）：甲醇配制，于-20℃冰箱冷藏保存；维生素A和E混合标准应用液（VA 1μg/ml，VE 5μg/ml）：测定前，按文献^［¹³^］方法对维生素A和维生素E标准储备液浓度进行标定，再以其实际浓度用甲醇稀释成混合液。实验用水为Millipore超纯水（18.2 MΩ·cm）。