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【求助】请教:液相,检测波长问题?

液相色谱(LC)

  • 我做HPLC检测催化的药物样品,c18柱子,254nm检测波长,流动相是甲醇(或乙腈)和酸性醋酸盐缓冲液,样品是溶解在磷酸盐缓冲液的药物。在3min一直有明显的吸收峰,面积甚至比药品更大。空白的磷酸缓冲液也有这个峰,纯水就没有。我试了磷酸二氢钠,磷酸氢二钠,磷酸二氢钾,磷酸氢二钾分别检测,结果磷酸氢二钠和磷酸氢二钾都有这个峰。换了一根柱子还是有这个吸收峰,不知道是什么原因。应该不是药品污染,我换了新的,还是这样。。。
    请问哪位高手能给点建议。。。谢谢!!
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  • guifei524398

    第1楼2010/07/08

    磷酸氢二钠、磷酸氢二钾有峰,而磷酸二氢钠和磷酸二氢钾则没有峰,同时,纯水中也没有。我是这样想的(虽然我不是很了解),是不是药物溶解的时候,某个成分和溶剂发生了反应,生成其他物质了呢?

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  • dabian

    第2楼2010/07/08

    是不是本身这两个物质在254就有吸收啊

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  • wty2010

    第3楼2010/07/08

    压力怎么样?会不会偏高很多,还有基线和压力线是否很稳定(主要是基线),如果都有问题考虑系统有可能被缓冲盐堵了

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  • Candy

    第4楼2010/07/08

    这个应该是溶剂峰,磷酸氢二钠和磷酸氢二钾都有这个峰,可能的原因是其pH与流动相的pH有一定偏差,所以导致溶剂峰的出现。建议用流动相溶解样品。

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  • yanghaichao0

    第5楼2010/07/08

    主要是因为流动相和样品稀释液不匹配造成的,也不能认为就是什么组分,应该是由于不匹配造成的基线变化。一般认为在5min以前都是溶剂峰。

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  • 有水有渝

    第6楼2010/07/08

    应助达人

    磷酸氢二钠和磷酸氢二钾在254nm基本没有什么吸收,你缓冲盐的浓度很高吗?

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