凝胶色谱(GPC)
tigertooth
第1楼2010/07/12
改改流动相条件试一试,但也不一定分得开,因为蛋白易聚集。
小不董
第2楼2010/07/13
可以增加有机相的比率,再就是你要确定样品是否会出现比目标物的分子量稍大的物质?如果样品中的分子量分布的确如现在一样,改变条件也是没有用的。再就是看你用的什么检测器?如果可以增加紫外或DAD检测器,多一点信息看是否是杂质,再考虑是否可以用其他办法把杂质峰分开。但凝聚色谱不是化学键作用来分离,凝胶色谱要避免所有的键作用,只按分子大小来出峰的。
wanttofly
第3楼2010/07/14
,不知道蛋白质,只不过玩了2天凝胶色谱,随便说说.用惯普通液相再用凝胶,怎么都感觉是既简单又粗糙凝胶色谱跟液相色谱不同,是测定分子量,所以根本不需要考虑把2个峰分开,如果确实有2个独立的峰,意味着有2个分子量分布,且这2个分子量分布不重叠(相差可能是数量级).做他们合成的高分子,最理想的应该是一个正态分布峰,看过有人控制合成条件来得到双分子量物质的谱图,2个尖而已,根本不太可能像色谱那样基线分离,只有窄标的混标才是一个个分离的峰呢
第4楼2010/07/14
蛋白质特别容易变质,变性,不是很好做。溶液要求比较严,另流速也控制,不能太大。
crystal_cc_ice
第5楼2010/08/06
如果要用凝胶色谱来分离,只要确定好收集时间就行了,没有必要追求特别完美的峰,呵呵,个人意见
芝兰
第6楼2010/08/31
增加柱长,如两根柱子串联,可改进分离。或者改变盐浓度,也可改进分离,这主要和蛋白质在溶液中的分子状态有关。
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