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【求助】荧光扫描茶汤遇到的问题

  • hanzhiyi2004
    2010/07/15
  • 私聊

分子荧光光谱

  • 我们实验室用的是一台瓦里安的CARY ECLIPSE荧光分光光度计,我的实验材料是茶叶(干茶叶用100摄氏度的蒸馏水浸泡10分钟之后放到石英比色皿中进行扫描),不过我扫描的三维光谱,得到的峰很奇怪

    1:茶汤扫描出来的光谱,只有这个一个物质峰,而且漂移很厉害,从400nm开始,随着激发波长的增加,物质的最佳发射波长值也逐渐增加。而且这个峰很大,另外两个应该出来的峰反而由于值太小就显现不出来了,第一个图是我采集的图谱,下图是一个文献上采集茶汤的图。请有荧光经验朋友帮忙,谢谢
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  • teng1986

    第1楼2010/07/15

    个人认为,那些强尖峰是水分子的瑞利散射,而样品峰没有出来。

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  • andrewguan

    第2楼2010/07/15

    你那扫描出来的能叫三维谱图吗?
    呵呵
    都是杂散信号
    你的问题是1、发射波长随着激发波长在漂移,从而可以判断所得的信号是瑞利散射,及其倍频峰 2、由于你所测瑞利散射及倍频信号太强,因而完全干扰了样品的荧光峰

    建议1、加滤光片截除 2、换激发波长 3、若要做三维谱图,建议换日立的仪器

    文献给的图非常漂亮

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  • 锐飏

    第3楼2010/07/16

    建议你更换一下扫描的条件,ex范围设置为320nm到470nm,发射范围从375nm到550nm.然后再进行PL扫描

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  • hanzhiyi2004

    第4楼2010/07/16

    谢谢你给的这么多的建议,我后来直接扫描蒸馏水,也出现类似的峰,但是强度值很低,只有不到10,(而茶汤样本值很大),为什么只扫描蒸馏水的时候瑞利散射就不明显啊?

    andrewguan(andrewguan) 发表:你那扫描出来的能叫三维谱图吗?
    呵呵
    都是杂散信号
    你的问题是1、发射波长随着激发波长在漂移,从而可以判断所得的信号是瑞利散射,及其倍频峰 2、由于你所测瑞利散射及倍频信号太强,因而完全干扰了样品的荧光峰

    建议1、加滤光片截除 2、换激发波长 3、若要做三维谱图,建议换日立的仪器

    文献给的图非常漂亮

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  • andrewguan

    第5楼2010/07/20

    光电倍增管的信号跟测量时的条件有关
    如电压、狭缝等
    所以你只扫描蒸馏水的时候是否条件一样?
    另外荧光跟紫外不一样,不要以为做蒸馏水就能扣背景
    荧光只有真谱和表观谱
    扣背景没意义

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  • fragr

    第6楼2010/07/24

    茶叶浸出物的散射导致的信号响应强于直接的蒸馏水。

    hanzhiyi2004(hanzhiyi2004) 发表:谢谢你给的这么多的建议,我后来直接扫描蒸馏水,也出现类似的峰,但是强度值很低,只有不到10,(而茶汤样本值很大),为什么只扫描蒸馏水的时候瑞利散射就不明显啊?

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  • zwyu

    第7楼2010/07/29

    fragr(FRAGR) 发表:茶叶浸出物的散射导致的信号响应强于直接的蒸馏水。

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  • 夕阳

    第8楼2010/08/01

    应助达人

    楼主最好将仪器的所有条件传上来(例如仪器的原始报告)以便分析。

    此外,关于茶叶的激发与发射波长,在文献中给出的是多少?你上传的文献三维图谱看不清楚。

    还有你做的图谱也不像三维图谱。

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