【月底大奖大讨论】【200积分奖励】如何快速确定激发和发射波长？

没做过，是否和紫外一样，配置一个PPM级的，进行扫描？

用荧光光谱仪就可以做到的。先可以试几个波长激发扫出发射峰位置。再用这个发射波长扫激发就找到了激发波长。就OK了。

有的厂商的软件中有“预扫描”功能，能自动给出激发、发射波长的建议值。一般对液体样品挺好用的，固体的话就不行。

当然是用3D扫描去确定啦

不建议用预扫描功能，很多时候给的并不是被测物质的荧光峰。如果3D扫描功能就简单了，做个3D扫描，其中荧光峰位置不随激发波长变化的差不多就是被测物质的，然后用该发射峰波长做激发光谱扫描，再用得到的激发波长做发射光谱扫描。几个来回一般就可以找到。
假如没有3D功能，就只能用笨方法了，先做紫外扫描，找到一个或几个吸收波长，以此为依据，在固定的间隔波长下做多个发射光谱扫描，同理，荧光峰不随激发波长改变的一般就是啦。
要注意排除散射，杂散光。
个人意见，不对的地方欢迎纠正，呵呵。

应助达人

采用三维扫描方式为正解

首选3D扫描，但时间较长。
如果仪器没有3D功能的话，最好的方法是采用0nm激发功能，确定最大发射波长（即固定激发波长为0nm，再做发射扫描），然后定最大发射波长，再回扫激发波长，确定最大激发波长。最后，再重新在最大激发波长处扫描发射光谱，确定最大发射波长（此最大发射波长和最先找到的最大发射波长会有所偏差）。以后面确定的最大发射波长为准。

我觉得反而用250nm，280那么，或是350nm几个点去尝试更方便。不知0nm是什么道理哈

建议采用三维荧光光谱扫描，一次扫描可得“激发波长-发射波长-荧光强度”三维光谱图谱，可利用软件分析将其调整为等高线图谱，等高线圆圈较密集的可找到目标物质的激发波长和发射波长。
此外，还可通过“激发波长/发射波长-荧光强度二维荧光光谱”、“紫外-可见吸收光谱”进一步验证激发波长。理论上，物质在该波长处受光激发，发射荧光，则物质在该波长处定有吸收；反之，物质在该波长处有吸收，但不一定能够受该波长的光激发，从而发射荧光。