小卢
第1楼2010/08/01
2.调整流速,保留时间会和流速成反比变化吗?
例子:头孢曲松钠含量测定
条件:波 长:270nm
色谱柱:C18,5um *4.0mm*15cm
流动相:乙腈(四庚基溴化铵):ph7.0磷酸盐:ph5.0枸橼酸液:水
依 据:USP31
2.1流速:2.0ml/min时图谱:
2.2流速:1.0ml/min时图谱:
2.3分析:
这是个usp标准的实验,我们很久没有做过了,因此第一次实验就完全按照其方法规定的要求来做。结果在流速2.0时,保留时间为3.8min,出峰时间太短了。为了使分析有关物质时,能把相关杂质分离出来,就通过调整流速来延迟保留时间。一般情况下,流速和保留时间是成正比的,那么,2.0时是3.8,1.0时就应该是7.6,结果看图谱为:7.5,基本符合了这个规律。因此大家在调整流速时可以按照这个规律来适当调整。
小卢
第2楼2010/08/01
3.比例阀出现问题能维护的好吗?
比例阀出现问题后,液相实验几乎就无法进行了,比如实验过程中:基线无法走平稳、梯度洗脱无法进行、单泵洗脱也出问题等等。这个时候就要更换比例阀了,但是如果不想更换、也不想请厂家工程师来维修,怎么办呢? 大家可以试下我曾经用过的一个方法:
打开purge阀,使管路液体走旁通直接到废液桶;
调节A、B、C、D泵的比例,分别为25%;
第一步:冲洗10%硝酸(10→100)4h,流速1.0ml/min;
第二步:更换60℃~80℃的超纯水(超纯水加热至80℃),冲洗3~4h,流速1.0ml/min;
第三步:更换10%异丙醇(10→100),冲洗4h,流速1.0ml/min;
第四步:更换超纯水,冲洗3~4h,流速1.0ml/min(或者0.5ml/min,冲洗过夜)
3.1比例阀出现问题时的图谱:
空白图谱:
样品图谱:
3.2处理后图谱:
空白图谱:
样品图谱:
3.3分析:
此方法是第一次使用,也没想到会成功,但如此维护后,在以后实验中,无论是走单泵还是走梯度都没有问题,因此我想此方法还是有效的,值得收藏。除此之外,还有一个意外的收获:把一个有问题的真空脱气机维修好了。当时的具体情况是这样的,由于我们自己的失误把流动相走干了,当第二天发现时,仪器管路中全是气泡。于是我们仔细的冲洗整个管路,但脱气机还是红色报警无法解决。但我们使用上面方法把比例阀维护好后,我们就照葫芦画瓢,也来维护一遍脱气机,完全相同的方法,结果脱气机也正常了,可以说此意外收获非同小可啊。
小结:
药物分析中还有很多问题我们搞不懂、弄不明,尤其是液相分析时,图谱的问题多而复杂。我在这里也就简单的介绍了几个小问题,我们可以一起讨论,一起寻找更多、更好的解决办法。
欢迎大家的回帖、讨论!
备注:
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