知足常乐!
第1楼2010/08/19
1. 目的PURPOSE 成立Agilent 高效液相色谱仪的操作与维护规程,确保色谱仪的精确操作,以获取精确的测定数值。
2. 适用规模SCOPE
适合用于Agilent 高效液相色谱仪的操作及维护。
3. 解说DEFINITIONS
N/A
4. 职务和责任RESPONSIBILITIES
QC主管 确保阐发员接受本办法培养训练。
QC阐发员 应严格根据本办法执行。
QA 监视本IOP的执行。
5. 步伐PROCEDURE
5.1 色谱仪构成
安捷伦高效液相色谱仪由脱气机,打点滴泵,柱温箱,自动进样器,检验测定器及体系software构成。
5.2 操作步骤:
5.2.1流动相的筹办
将去离子水和有机溶剂别离用0.45um微孔滤膜过淋,祛除颗粒性杂质,倒入贮液瓶,超引起听觉的振动波脱气15分钟后,将之放置在摄谱仪的试药架上。
5.2.2开启稳压电源,之后依次开启各组件的电源开关及计较电机源开关,待摄谱仪路程经过过程自检后,在计较机 "Windows"步伐中,对"Instrument 1 online" 轻击二次,即步入在线事情站应用步伐。
5.2.3要领编纂和参量设定
5.2.3.1 成立要领 在"Method & Runcontrol" 银幕下,睁开"Method"菜谱,选择 "Save Method as" 条款,银幕睁开后,输入要领文件名, "OK" 明确承认,即成立了以原步伐初始设定参量为前提的要领。
5.2.3.2要领参量前提的编纂 睁开"Method"菜谱,选择"Load Method",选择欲编纂的要领文件名,使该要领进时髦下施用状况。睁开"Method"菜谱,选择"Edit Method",轻击鼠标,在需要编纂的条今朝面框内划"×"。"OK"明确承认后,即步入分项具体编纂银幕。
5.2.3.3在"Method information" 银幕下,输入要领撮要、合用对象、柱子型号、编纂日子及操作人等内部实质意义,"OK" 明确承认。
5.2.3.4在泵参量 “Pump Flow、Solvent%、 Pressure”银幕下,设定流速、各通道溶剂比值、压力(高限和低限)等参量。 梯度洗脱时, 在梯度时间表(time table)内,设定肇始时间和肇始溶剂比值、终止时间和终止溶剂比值、流速等。
5.2.3.5在柱温" Heater "银幕下,设定柱箱温度。
5.2.3.6 在检验测定器参量 "UV Signal" 银幕下,设定检验测定波长、旌旗灯号收罗时间,最小峰宽,旌旗灯号响应值,基线自动均衡参量等条款, "OK" 明确承认。
5.2.3.7 在“Signal Details”银幕下,选"Add to Method"条款,设定旌旗灯号收罗、积分的具体参量,和旌旗灯号通道开启时间、终止时间和延永劫间。
5.2.3.8在 "Edit Integration Events" 银幕下,编纂积分参量。如负峰积分、开启和终止时间、溶剂峰、肩峰措置惩罚时间、基线选择、最小峰宽、识峰域值等。
5.2.3.9 在 “Specify Report”项下,设定陈诉格局。如在 “Style”入选择"Chrom+Short",则打印超卓谱图和扼要的数值陈诉。选" erformance",可打印超卓谱峰和柱机能的完备陈诉。在 "Quantitative Results"入选择计较要领(百分点法、内标法、外标法等)、数值种别(峰高或者平面或者物体表面的大)、峰明确承认要领(保留时间或者旌旗灯号辨认)等。在 "Chromatogram" 项下选择色谱图巨细、式样及峰示明内部实质意义(化合物名或者保留时间)等,"OK" 明确承认。
5.2.3.10 要领的贮存 打开 "Method" 菜谱,选择 "Save Method" 将上面所说的编纂的要领保存到磁盘。
5.2.3.11 内存要领的挪用 对已编纂共保存到磁盘的要领,开机步入应用步伐后,在 "Method & Runcontrol" 银幕下,睁开 "File" 菜谱,选择 "Load" 项,输入要领名,"OK"明确承认,使该要领进时髦下施用状况。已进时髦下状况的要领,若需要修改参量,可睁开 "Instrument" 菜谱举行。
5.2.4自动进样序列表及数值文件的设置
5.2.4.1点击“SEQUENCE”下拉式菜谱,拔取“SEQUENCE PARAMETERS”,设置数值生存体式格局及生存文件名,若选用“不佣人的劳力”则数值顺次自动生存, 若选用“PREFIX/COUNTER”则需从头设定命据文件编码,以区分于以前的数值文件.设置好后,点击“OK”标识,归回主界面。
5.2.4.2再次点击“SEQUENCE”下拉式菜谱, 拔取“SEQUENCE TABLE”步入样品序列设置界面,按进样挨次设置“LOCATION”-样品瓶位置, “SAMPLE NAME”-样物品名称称, “METHOD NAME”-要领文件名, “INJ/LOCATION”-进样回数, “SAMPLE AMOUNT”-样品重量, “INJ VOLUME”-进样体积等参量.设置完结后, 点击“OK”标识, 归回主界面。
5.2.5 样品标定与数值陈诉
5.2.5.1 开始工作泵(按泵的 [ON/OFF] 键)和检验测定器(按检验测定器的[ON/OFF] 键)。
5.2.5.2 待基线平顺,"Run Status"银幕呈现"Ready" 旌旗灯号后,便可点击“RUN CONTROL” 下拉式菜谱,选择“RUN SEQUENCE”,自动进样器将按“SEQUENCE TABLE”所设的瓶号依次进样。
5.2.5.3 标定完结,从"View" 菜谱中,选择 "Data analysis" 条款,步入数值阐发银幕,睁开 "File" 菜谱。选择 "Load Signal",可以挪用不论什么1个样品数值文件,睁开色谱图。可选择 “Integration”, 举行手动积分措置惩罚;也可选择 "Calibration" 成立尺度曲线;也可选择"Report", 打印措置惩罚后的数值陈诉。
5.2.6关机
5.2.6.1样品标定完结,在 “Instrument” 菜谱下设定各通道溶剂比例,用木醇对色谱柱举行洗濯。
5.2.6.2 柱子冲刷完结后,轻击体系“OFF”键,遏制各组件的运行,封闭主操作界面,最后封闭摄谱仪各组件的电源开关。
5.2.7 每一次阐发样品以前必需用已知含量的参照样对摄谱仪举行校验,当实测与标值的相对于误差<0.3%时可举行样品试验,不然必需对体系举行调解,使其到达划定要求。
6. 注意事项
6.0 注意事项及维护NOTICE AND MAINTENANCE
6.1 配备布置不中断电源及稳压电源,以避免电源突开或者停时导致烧坏。
6.2 如不做分散、检验测定,应将紫外检验测定器封闭,以延伸紫外线源生存的年限。
6.3 全数标定完结后,用适当的溶剂冲刷泵、色谱柱和检验测定器。
6.4 按国度技能监视局应按期鉴赏,应切合划定。
6.5 操作以前查抄色谱仪各器件是不是运作正常、管路为无死体积保持,流路中无拥塞与漏液、气泡儿。
6.6 高纯净度的试药配合制造流动相,配合制造好流动响应用0.45um滤膜过淋。
6.7 压力计无压力颠簸,不不变、压力太高时,要停机举行查抄。
6.8 色谱仪要放在远离磁力场、温度0~45℃,湿润程度0~80%处所。
6.9 安装色谱柱时,不要使劲过大,以不漏液为准。