【第三届原创参赛】UPLC-MS-MS法检测水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物和亮绿

图1.五种化合物结构图

Map 1. Structure map of five compounds

一、试剂与材料

1.1仪器材料 UPLC- Quattro Premier XE超高效液相色谱-串联质谱仪，Waters公司生产；飞利浦食品加工机；高速离心机TDL-5-A，上海飞鸽；旋涡混合器XW-80A，上海青浦沪西；旋转蒸发仪NA-1001-WA，日本东京EYELA；中性氧化铝小柱(LC-Alumina-N)：100mg,3mL

1.2试剂和标准品 孔雀石绿（MG）、结晶紫（CV）、隐色孔雀石绿（LMG）、隠色结晶紫（LCV）、亮绿（BG），德国Dr.Ehrenstorfer公司；乙腈、二氯甲烷、异丙醇、乙酸铵、甲酸、冰乙酸均为色谱纯，天津科密欧公司，氯化钠、硫酸钠是分析纯，天津科密欧公司；超纯水，Millipore超纯水器自制。

1.3 标准品的配制

1.3.1标准储备液配制：分别称取10.0000mg（精确至0.0001mg）的MG、LMG、CV、LCV、BG五种标准品，用乙腈溶解并定容至100mL,制成浓度为100μg/mL的标准储备液，0-4℃避光保存

1.3.2混合标准储备液配制：各取MG、LMG、CV、LCV、BG储备液10mL，用乙腈稀释定容至100mL,制成浓度为10μg/mL的混合标准储备液，0-4℃避光保存

1.3.3混合标准中间液及工作液配制：移取10mL混合标准储备液，用乙腈稀释定容至100mL,制成1μg/mL的混合标准中间液，标准品工作液按照需要逐级稀释，低浓度标准品工作液临用时使用定容溶剂稀释配制。

1.4 试剂的配制

1.4.1乙腈、0.1%的甲酸：取0.5mL甲酸加入到500mL的乙腈中，摇匀；

1.4.2 5mmol/L乙酸铵水溶液、0.1%的甲酸：称取0.19g乙酸铵溶于500mL水，然后向其中加入0.5mL甲酸，摇匀；

1.4.3定容溶剂：乙腈：5mmol/L乙酸铵（冰乙酸调节PH=4.5）=8：2。

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