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【转帖】测定土壤中脱氢酶活性时，为什么样品不显红色？

天涯就是天地

2010/08/19

土壤固体废弃物监测

土壤脱氢酶测定步骤：
⑴ 称取通过4mm筛的土壤5g于带塞试管，加0.1%TTC溶液（0.2mol/L Tris-HCl缓冲液配制）5mL,2mLpH=7.6的0.2 mol/L Tris-HCl缓冲液，充分振荡，使无颗粒状土壤存在。在37℃下置暗处培养24h。
⑵设置对照。对照以pH=7.6的0.2 mol/L Tris-HCl缓冲液代替TTC。在37℃下置暗处培养24h。
⑶培养结束后，加2滴浓硫酸终止反应。然后加入5 mL甲苯，摇床上浸提30min，完全提取三苯基甲簪（TPF），稳定数分钟，将培养液移入离心管，于4000r/min下离心5min。取上层有机溶液在分光光度计上492nm处比色。

我做了好几遍实验，但土壤样品经过24h培养后，怎么也不显红色，我不明白问题出在什么地方，想想不应该是土样的问题吧，我采用的都是新鲜的土样，应该具有很高的酶活性才对，请做过这个实验的朋友指点迷津。

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rewarden

第1楼2010/08/19

对照有没有显示红色啊？还有就是我不明白为什么对照不加TTC？

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suizi0414

第2楼2011/05/12

请问你们做的时候设置无基质对照和无土对照了吗？测定土壤时比色用的什么参比呢？

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