【求助】4个标准品却出现5个峰

改变PH峰的数目发生改变的话，说明混标里有对PH敏感的物质。可以查一下文献确定一下。
至于同样条件下连续进样出峰数目不一样，很有可能是你的冲洗条件太弱，或者是进样量太大。前一种情况可以增加碱冲洗的时间，后者的话可以降低进样压力或时间，还可以配置低浓度的样品。
50%甲醇溶解的样品区带遇到硼砂很容易析出来形成所谓的鬼峰，所以降低溶解样品用溶剂里甲醇的比例很关键。

请教一下楼上的大侠，为何进样量的大小会影响出峰的多少呢？
不管量大或量少 ，只要有那种物质不是都会出峰么？

进样量过大的话，再加之冲洗条件不强的话，会引起样品在管壁上残留进而在下一次分离的时候进行二次电迁移，从而导致鬼峰的出现。
道理很简单，假定一种物质在一定电压下电迁移的速度是恒定的，那么有二次迁移的那部分样品相当于延长了迁移时间，从而出现迁移时间改变。
比较好的方法是将四个样品分别作样进针，有利于后面的成分比对。

那我们要如何确定鬼峰呢？会和样品峰混在一起么？

不会的。如果你的四个单个样品分别进针，每一针只出单峰的话，那么混标里多出的峰肯定是鬼峰。很好判断啊

非常感谢，现在我把样品稀释之后没有多一个峰出现了，反而是有两个峰粘在一起分不开了，没有分离的迹象。请问我要如何调节呢？是改变PH 还是改变缓冲液的浓度？ 还是用硼砂，除了那个峰没有分开之外其余的分离度都很好。。。

不用调节了，这个已经是正确的结果了。如果你真正了解二次迁移的话，就会明白所谓的两个峰其实是一种物质的一次迁移和二次迁移存在时间差的结果，即有一个峰是鬼峰。之所以少一个峰，是因为样品稀释后在管壁上残留的量很少，不足以单独出峰，因而消除了二次迁移的结果。

不是 我指的是我的4个对照品的混标现在只出三个峰了，少了一个样品峰，是嘧啶和嘌呤类的两个峰粘在一起 分不开了 。不知道要如何如调节？我分离的是核苷类物质。

可以目前条件周围再试着优化一下试验条件！