【第三届原创参赛】实验室微量移液器校准过程（10月）

乐果

2010/10/01

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综合仪器采购

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实验室微量移液器校准过程

微量加样器（移液器）最早出现于1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明，其后，在1958年德国Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器，成为世界上第一家生产微量加样器的公司。这些微量加样器的吸液范围在1—1000μl之间，微量加样器发展到今天，不但加样更为精确，而且品种也多种多样，如微量分配器、多通道微量加样器等。如下图：

移液器的工作量大，长期使用，将会使弹簧弹力发生变形，加之本身是塑料，不耐磨擦，就会产生误差。为了保证移液器传递液体量的准确性，必须对移液器进行定期校准。为了更好地发挥该类计量仪器的作用，对新购进的仪器要进行校准才能使用；对正在使用的计量仪器，由于长期使用会造成其示值于度量对象的误差，这种误差若不进行控制，及时校正，必定会影响科研工作。因此，对使用的移液器要定期检定、校正，并建立档案，只有这样才能使其在日常工作中更好的发挥作用。

附件：

实验室移液器校准过程.doc

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第1楼2010/10/01

一、气密性检测

拿到一个微量移液器后首先就要要确定他的气密性怎么样？连气密性都不好何谈准确度，本次气密性检测是将移液器吸满液体后，手持垂直放置15s，检查吸嘴的尖头有无液滴，如有，则说明漏气。如下图：

1000μl 200μl

二、准确性检测

用称重法检测。通过对水的称重，转换成体积（体积=质量/密度），鉴别移液器的准确性。校准过程采用三点校准法，即根据移液器量程范围，选取最低量程、中间值和最高量程三点分别测试10次，各个测试点取其平均值，计算其准确度（inaccuracy）和精确度（imprecision）。

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第2楼2010/10/01

三、实验过程

所用仪器：电子分析天平双蒸水

校准设备：100-1000μl 20-200μl 5-50μl

环境条件：独立房间，温度控制：15~30℃（±0.5℃）湿度控制：60%~90% 工作台面：防震、防尘、

所得数据：

100-1000μl

量程	重量（g）
量程	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
100μl	0.0945	0.0952	0.0957	0.0953	0.0951	0.0951	0.0948	0.0946	0.0949	0.094
500μl	0.4954	0.4943	0.4944	0.4945	0.4927	0.4939	0.4956	0.4921	0.494	0.494
1000μl	0.9985	0.9975	0.9998	1.0015	0.9997	0.9993	0.9982	0.9996	0.9993	0.9998

20-200μl

量程	重量（g）
量程	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
100μl	0.0963	0.0962	0.0967	0.0967	0.0963	0.0965	0.0966	0.0963	0.0965	0.0965
200μl	0.1978	0.1976	0.1973	0.1976	0.1971	0.1972	0.1975	0.197	0.197	0.1973

5-50μl

量程	重量（g）
量程	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
50μl	0.0497	0.0495	0.0496	0.0494	0.0492	0.0496	0.0495	0.0496	0.0495	0.0496

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第3楼2010/10/01

计算公式：

标准偏差S=

变异系数CV=

计算结果：

量程		平均值	S	CV
100-1000μl	100μl	0.09492	s=0.0009	cv=0.95%
	500μl	0.49409	s=0.0012	cv=0.24%
	1000μl	0.99932	s=0.00109	cv=0.11%
20-200μl	100μl	0.09646	s=0.00014	cv=0.28%
20-200μl	200μl	0.19734	s=0.00018	cv=0.18%
5-50μl	50μl	0.04952	s=0.00027	cv=0.14%

从本次结果可看出，大量程微量移液器在测量小值时变异系数较大。在满量程测量时变异系数是最小的，因此建议用户在使用时最好使用最大量程。

注意：称重法实验室必备条件是高度灵敏的分析天平（定期校准）、双蒸水和称量容器。水、移液器和吸嘴必须具有相同的温度（20℃时水的密度为0.09982）。

四、影响准确性的因素

1）操作错误：包括30℃手持式移液器吸液；与吸嘴不匹配，较易造成脱落；残留的试剂倒流，污染活塞和密封圈；快速吸液排液，导致部分液体残留在吸头上等都会影响准确性。

2）移液器损坏：包括移液器的头部被刮擦，断裂受损；活塞受污染；弹簧受腐蚀等。

3）操作条件的影响：包括未作调整吸取与水不同密度的液体；样品和移液器的差别太大等。