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【原创】对LC的认识（11）

xue2009

2010/10/15

今天继续谈我对LC的肤浅认识：
1、灵活使用缓冲溶液
前几次我在认识中提到：“分析有机酸是把PH值调到3一般是可行的”，这是基于有机酸在反相柱上的保留一般都不强，所以加酸抑制电离，让有机酸以分子形式存在得以保留，但如果目标化合物的疏水性很强，依据疏水效应就能在反相柱上很好的保留，那就完全没必要调PH值了。有位版主的资料很好，我看了立马总结出了自己的想法：目标化合物分子量大于1000，考虑用凝胶色谱等等其他的方法。分子量小于1000是我们主要考虑的，如果目标化合物溶于有机溶剂，说明它的极性较弱或者中强（水的极性是最强的)，如果其疏水性不是太大的话考虑用正相色谱分离；如果目标化合物溶于水，说明它具有较强的极性，如果它在水中以分子的形式存在，那么依据纯粹的反相保留机制就可分离，也就是说不用加缓冲溶液，不用调PH值，仅仅依靠纯粹的反相保留。如果它可离子化，那么就要按照我前面总结的根据有机酸，有机碱的分析方法来分析，这里不累赘。我个人认为要达到这种境界：一看到目标物的结构，官能团等性质立马要能判断出主要依据什么保留机制，怎么选择流动相，怎么设置洗脱程序。能做到这样，说明你应用LC已经入门了。
2、必要的分析结果的能力
不光要会操作LC，会应用它，而且更重要的是对它的实验结果进行分析，我发现在论坛上一些人对于基本的概念还是模糊的，比如加标回收率，比如精密度实验，比重复性实验，比如稳定性实验，比如各种方法的实质。下面我再讲一遍，希望对大家有所帮助：首先是精密度实验，其实质是考察的仪器的精密度，也就是一个样品重复进6针，算RSD，它反应的是仪器的优劣，对样品说明不了任何问题，这点大家一定要记住。重复性实验是反映样品的，即是配置6个平行样品，按照相同的前处理步骤，最后计算RSD，它反映的是样品的重现性。其次关于加标回收率，这个我解释过一遍，详细解释比较麻烦，谁用得上的时候，如果有疑问加我QQ1002658908，我单独跟他解释。各种方法的实质，像外标法，内标法，标准加入法，等等。这里我详细讲下标准加入法，它其实跟做加标回收率很相似，都是向样品中加入标准物质，保证样品一样，加入不同浓度的标样，做标准曲线，最后可以得到样品的浓度，这种方法最大的优点是排除了实验条件或者样品基质效应所带来的误差，实验结果准确，但操作很麻烦，所以一般不用。

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雪妖

第1楼2010/10/15

哈哈，那肯定加楼主QQ的都加爆了，我是第一个加的吧
真的是很好的老师

0

ruby70303

第2楼2010/10/15

太强大了，学了不少，希望楼主继续，很期待下部作品

0

阿帕

第3楼2010/10/17

真厉害！偶像。。。

0

幽灵龙猫

第4楼2010/10/17

支持xue2009版，有时候写得很专业，得认真看才能理解

0

liuliuhui

第5楼2010/10/22

看来我的LC还没有入门啊！
楼主赶快写续集吧

0

头像更新中，请稍候…

第6楼2010/11/06

慢慢学习，慢慢积累，呵呵~
liuliuhui(liuliuhui) 发表:看来我的LC还没有入门啊！
楼主赶快写续集吧

0

阿三

第7楼2010/11/06

楼主写的很专业，赞一个
环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:慢慢学习，慢慢积累，呵呵~

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阿三

第8楼2010/11/06

看第一点能知道楼主化学功底很好啊

0

小鸟飞翔

第9楼2010/11/07

对样品说明不了任何问题，但是样品对结果还是有影响的。对不？

0

xue2009

第10楼2010/11/07

对，就是这个意思
小鸟也飞翔(tonyding) 发表:对样品说明不了任何问题，但是样品对结果还是有影响的。对不？

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