【求助】多糖分子量分布GPC柱子的选择问题

应助达人

直接联系各大ＧＰＣ柱的代理商，把你的情况反应一下，让他们帮你选择一根合适的色谱柱，然后你再比较一下各家的性价比。
凝胶的选择根据实验目的不同选择不同型号的凝胶。如果实验目的是将样品中的大分子物质和小分子物质分开，由于它们在分配系数上有显著差异，这种分离又称组别分离，一般可选用SephadexG-25和G-50，对于小肽和低分子量的物质（1000-5000）的脱盐可使用SephadexG-10，G-15及Bio-Gel-p-2或4.如果实验目的是将样品中一些分子量比较近似的物质进行分离，这种分离又叫分级分离。一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶，层析过程中这些物质都能不同程度地深入到凝胶内部，由于Kd不同，最后得到分离。

首先感谢版主！"一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶"这一点我也觉得对，但是我在网上查了一下OHPak SB-805 HQ 的排阻限是400万，OHPak SB-804 HQ 的排阻限是100万，OHPak SB-803 HQ 的排阻限是10万，而我的对照品中最大分子量为200万，现在是以上三根柱子按进样器-805-804-803-2414检测器的顺序串联，这样可以吗？
我问了一下waters 的工程师，她的回答是：这样是可以的，令我不解。望各位大虾解答我的疑惑，谢谢！

应助达人

串联当然是可以的，但就是不知道从大到小和从小到大哪个效果好，如果你手上有这三根，倒是可以试一下。

一般GPC都是多柱串联使用，因为GPC柱一般都有一个分离限的问题，而且柱效都不高，为了提高分离效果多柱串联比较好。

分子量200万的不是还得要通过排阻限是100万的SB-804 HQ柱和排阻限是10万的OHPak SB-803 HQ 柱吗？能过去吗？为什么能呢？急待解答！