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【原创】【第三届原创参赛】原子力显微镜在蛋白质研究中的应用

allisa

2010/10/28

扫描探针显微镜SPM/AFM

蛋白质是荷兰科学家格里特在1838年发现的，它是生物体内一种极重要的高分子有机物。没有蛋白质就没有生命，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。人体的生长、发育、运动、遗传、繁殖等一切生命活动都离不开蛋白质，因此对于蛋白质的研究显得极其重要与急迫。AFM 对于蛋白质的研究是一个极好的工具，它可以测量蛋白质空间结构，表征蛋白质的结构与功能、了解分子间的相互作用等等。

样品制备

当用AFM对蛋白质进行观察时，样品制备很重要。蛋白质样品的制备原则与粉体材料基本相同，也需要固定到基片上，只是要研究一些活体蛋白时，必须为之提供一定的生理环境，如生理缓冲液，所以大多需要在溶液中进行研究，如成像，测定力曲线以研究其构形，构像转变等特性．所以应该选择合适的方法在固定蛋白质样品的同时仍能保持其生物特性。具体要求和方法如下：

样品制备要求

样品表面平整，高度起伏≤10一20μm;表面有一定的硬度;基底面平滑;样品在基底表面要求相对均匀、分散等。
样品制备过程

蛋白质样品制备过程有两种方法

蛋白质吸附固定法: 使用在中性条件下带负电云母片、玻璃及氧化硅为基底，将一定浓度的带正电的蛋白质溶液滴加于云母表面，蛋白便可很容易通过吸附固定吸附于云母表面

蛋白质共价固定法: 在某些特定的条件下，蛋白分子需要通过共价吸附才能检测到。利用蛋白质分子上的氨基与疏基丙酸的羧基形成肽键连接的原理，进行蛋白质的固定。

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titi

第1楼2010/10/28

楼主还没有写完吧？？等完成后再来拜读哈！！

0

mse2008

第4楼2010/10/30

希望楼主尽快完善，我们也好学习下
呵呵

0

社区=冬季=

第5楼2010/11/01

楼主作品未完成，就先不参加10月的评奖了吧

0

allisa

第7楼2010/11/02

工作模式
由于蛋白样品本身的特殊性，因此用AFM对其研究主要有两种模式：接触模式和轻敲模式。
一般情况下，在大气环境下扫描，通常使用轻敲模式；在液体环境下扫描，最好使用接触模式，有时也可以使用轻敲模式。

0

allisa

第8楼2010/11/02

第二个部分：描述AFM对蛋白质的表面成像、分析蛋白质的大小和体积、测量蛋白质空间结构，表征蛋白质的结构与功能、了解分子间的相互作用等等。本文主要从AFM样品制备及其在蛋白质研究中的应用等几个方面进行了系统地阐述。

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