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【求助】出峰时间延后了是什么因素造成的?

液相色谱(LC)

  • 如题,最近在做银翘的连翘苷,前两个月出峰时间在50分钟左右,但是最近做的时候设到60分钟都还没出峰,于是就调下比例,这次就出峰了,但是对照的峰却和样品的峰对不上了······差了有5分钟·····郁闷啊····求助一下到底有什么因素会造成这样?(机器是Waters2695,保证机器没有问题)
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  • coffee8

    第1楼2010/11/01

    是否是柱子的问题?
    有时候没有平衡好也会有这样的现象
    液相做三聚氰胺的时候,开始几针出峰都会延迟

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  • wdl158160

    第2楼2010/11/01

    柱子多平衡一会试试,一般第一针都不好

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  • Vigorous

    第3楼2010/11/02

    你用的是梯度还是等度?梯度的话看看比例阀有没有问题。有可能是流动相比例不准

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  • 有水有渝

    第4楼2010/11/02

    应助达人

    温度,色谱柱,流动相比例的差异都可能造成保留时间漂移,对照品与样品保留时间差那么多,我都怀疑那两个可能不是同一个物质了,把对照品加入到样品溶液中进一针看看出峰情况,检查一下样品前处理有没有问题。

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  • yukepotato

    第5楼2010/11/02

    恩,楼上说的很好。再问下楼主是用的手动进样还是自动进样,这里也可考虑下是否为进样原因。但是相差5-6分钟很是疑虑啊!

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  • 阿帕

    第6楼2010/11/02

    楼主的保留时间是一下子从50-60 还是慢慢变化的呢? 对照品的保留时间也是从50-60吗? 好奇怪啊

    fly1988(fly1988) 发表:如题,最近在做银翘的连翘苷,前两个月出峰时间在50分钟左右,但是最近做的时候设到60分钟都还没出峰,于是就调下比例,这次就出峰了,但是对照的峰却和样品的峰对不上了······差了有5分钟·····郁闷啊····求助一下到底有什么因素会造成这样?(机器是Waters2695,保证机器没有问题)

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  • fly1988

    第7楼2010/11/02

    流动相是乙腈和水,用的是等度洗脱,自动进样的,今天换机器再做了一次,又可以了·····换了根柱子,我觉得和柱子没多大关系,因为这根柱子才用了4个月啊,我反而觉得和机器有关,昨天机器灯能量值低了,加上基线又不稳,一做含杂质多的样品就会出现类似情况,只不过这次有点离谱了····

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  • 〓猪哥哥〓

    第8楼2010/11/03

    灯能量和保留时间没有关系哦。原因可能还是流动相的问题吧

    fly1988(fly1988) 发表:流动相是乙腈和水,用的是等度洗脱,自动进样的,今天换机器再做了一次,又可以了·····换了根柱子,我觉得和柱子没多大关系,因为这根柱子才用了4个月啊,我反而觉得和机器有关,昨天机器灯能量值低了,加上基线又不稳,一做含杂质多的样品就会出现类似情况,只不过这次有点离谱了····

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  • lvdongming

    第9楼2010/11/05

    应助达人

    看看那里有点堵,看一下压力就知道,另外做了别的东西没洗干净.

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