linda_judica
第1楼2010/11/04
3. 结果与讨论
3.1 虫茶中茶多酚的两种提取方法的比较
分别将样一和样二以乙酸乙酯为空白进行紫外测定,结果如表二,可以看出:经超声波法提取出的样一其紫外吸光度为0.885,明显高于微波法提取的样二,并且,从同步进行的薄层层析分析结果中样一的斑点颜色比样二深,我们发现经微波处理的提取方法中,茶多酚的浓度较低,这说明超声波法提取出的茶多酚有效成分的含量明显高些。因此可以得出结论:采用超声波提取茶多酚的方法较好。
表二:虫茶中茶多酚提取液的紫外吸光值
3.2 聚酰胺柱层析与硅胶柱层析联合应用分离茶多酚
3.2.1 分析:聚酰胺树脂中含有较多酰胺键,能与酚羟基形成氢键而使茶多酚被吸附在树脂上,化合物分子中酚羟基数目越多,则越易被吸附,从而使茶多酚与不含酚羟基的化合物分离,洗脱液为淡黄色,减压浓缩回收乙醇与水后,进行下步分离。硅胶柱层析中根据茶多酚中成分的极性不同而采用不同极性的洗脱液将其分离,为减低茶多酚的氧化,洗脱液应保持酸性,故加入少量甲酸以控制pH值。
3.2.2 紫外测定结果:以对应的洗脱液为空白对流出物进行紫外扫描,结果如表三:
表三:洗脱液的紫外测定结果
根据测定结果,合并4~10、12~15、18~34、35~42、43~53、73~82、83号样品,再将合并液分别浓缩,标记为合并液I、II、III、IV、V、VI、VII。
3.2.3 薄层层析 将得到的合并液分别浓缩至1~2mL,然后通过TLC鉴别,采用硅胶G板,展距为6cm左右,硫酸—乙醇试剂及FeC13—Fe(KCN)6试剂为显色剂展开,合并液I、II、III、IV、V、VI、VII的比移值完全不同,因此可得出结论:以此分离方法对虫茶中的茶多酚进行分离,基本能得到较单一的成分。本实验由于时间等条件有限,未能对合并的洗脱液进行下步分离,使其进一步纯化。