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【原创】无菌操作基本技术

  • 省部重点实验室
    2010/11/08
    • 私聊

生命科学仪器综合讨论

  • 无菌操作基本技术
    1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
    2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
    3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，
    尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
    4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。
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  • dong3626

    第1楼2010/11/09

    应助达人

    对于做微生物尤其是霉菌的话，操作台只用酒精是无法彻底灭菌的，尤其是孢子。。
    要用专门灭孢子的药品熏蒸。
    还有操作的时候还是需要酒精灯的。

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  • 省部重点实验室

    第2楼2010/11/12

    mei霉菌 更让人都疼啊

    一培养 整个实验室 都是 孢子 呜呜

    ~~~~(>_<)~~~~

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  • wangjunyu

    第3楼2010/11/15

    应助工程师

    紫外灯在灭菌还是经常使用的。

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  • dong3626

    第4楼2010/11/15

    应助达人

    紫外灯的灭菌效果还是不好。。而且有诸多限制，比如紫外灯的强度，与物品间的距离等。

    如果是单独的一间无菌室的话，可以用臭氧灭菌。。紫外灯作为辅助。

    wangjunyu1113(wangjunyu1113) 发表:紫外灯在灭菌还是经常使用的。

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  • quin

    第5楼2010/11/17

    我们现在是单独一间无菌室。

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  • 雾非雾

    第6楼2010/11/21

    应助达人

    新洁尔灭（苯扎溴胺）的杀菌效果还不错。

    dong3626(dong3626) 发表:对于做微生物尤其是霉菌的话，操作台只用酒精是无法彻底灭菌的，尤其是孢子。。
    要用专门灭孢子的药品熏蒸。
    还有操作的时候还是需要酒精灯的。

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  • 雾非雾

    第7楼2010/11/21

    应助达人

    可能要喷雾+薰蒸灭菌才行。

    gl19860312(gl19860312) 发表:mei霉菌 更让人都疼啊

    一培养 整个实验室 都是 孢子 呜呜

    ~~~~(>_<)~~~~

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  • 雾非雾

    第8楼2010/11/21

    应助达人

    紫外灯就能产生臭氧的。

    dong3626(dong3626) 发表:紫外灯的灭菌效果还是不好。。而且有诸多限制，比如紫外灯的强度，与物品间的距离等。

    如果是单独的一间无菌室的话，可以用臭氧灭菌。。紫外灯作为辅助。

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  • 雾非雾

    第9楼2010/11/21

    应助达人

    要定期菌检，并根据菌检结果改变灭菌方式才比较有效。

    quin(quin) 发表:我们现在是单独一间无菌室。

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  • dong3626

    第10楼2010/11/22

    应助达人

    紫外灯的臭氧效果在小范围内可能有点作用。。
    对于无菌室来说，还是要用专门的臭氧杀菌。。

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