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【求助】外行人员实验需要用到透射电镜,有太大不懂的地方

透射电镜(TEM)

  • 1、透射电镜电镜观察内膜组织的细胞器,它的组织要求有多大?切片要切多少张,还是只能切一张?
    2、TEM 观察到的细胞器如线粒体、高尔基体等,除了描述其结构外,有没有办法做统计分析的呢,可以怎样统计呢?
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  • 天黑请闭眼

    第1楼2010/12/24

    是自己做还是请老师做?做生物电镜的老师对这个肯定门儿清啊。

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  • 85738816

    第2楼2011/01/10

    透射电镜生物样品制备步骤

    一.取材:
    组织块小于1立方毫米
    二.固定:
    2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。
    用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
    1%锇酸固定液固定 2-3小时
    用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次
    三.脱水:
    50%乙醇 15-20分
    70%乙醇 15-20分
    90%乙醇 15-20分
    90%乙醇 90%丙酮(1:1) 15-20分
    90%丙酮 15-20分
    以上在4度冰箱内进行
    100%丙酮 室温 15-20分三次
    四.包埋:
    纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3-4小时
    纯丙酮+包埋液(1:2)室温 过夜
    纯包埋液 37度 2-3小时
    五.固化:
    37度烘箱内 过夜
    45度烘箱内 12小时
    60度烘箱内 24小时
    六.超薄切片机切片 50-60 nm
    七.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
    八.透射电镜观察。拍片

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  • zhouzb

    第3楼2011/01/14

    实验室装修,加之工作忙,好久没来坛子里晃了,惭愧。
    1,理想标本大小1立方毫米,参考值。切片一般我们捞两个铜网,每个铜网上3-4张切片。
    2,可以做统计分析,要求照相时统一放大倍数,尽可能多的视野,然后用分析软件统计。

    11月的求助,只怕已经做了吧?

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