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【求助】毛细管电泳分离样品出现问题？

shuangleiii

2010/11/20

毛细管电泳（CE）

急！！手性药物的拆分-异常现象
毛细管电泳分离弱碱性药物：
我现在用5mg/ml 的样品，它就出峰了，有分离趋势，但是换成小浓度的1或0.5mg/ml的它就是个单峰没有分离趋势了！！！！请教一下这是什么原因：是因为药有问题呢还是说本身就没有分离趋势而是药里面含有什么杂质了呢？还是说因为浓度太小了？但是我看文献上的浓度也不大呀1或0.2的都有用过！

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sunpengwjh

第1楼2010/11/20

楼主缓冲溶液的pH是多少？

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i_am_ling

第2楼2010/11/20

在不同的条件下，样品带有不同的电荷，所受外界的力，就不同！

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cpudaxiao

第3楼2010/11/20

这个可以理解为，两种异构体只有分别具有足够量的时候，才能引起分离效果的差异，否则只能出一个峰。这个在ACE测蛋白时较常见。

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sunpengwjh

第4楼2010/11/20

很好的解释，在电泳时每个量发生变化，在缓冲溶液内的作用力不同！
cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:这个可以理解为，两种异构体只有分别具有足够量的时候，才能引起分离效果的差异，否则只能出一个峰。这个在ACE测蛋白时较常见。

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shuangleiii

第5楼2010/11/21

但是我用的是同一个缓冲呀只是样品浓度不一样而已
i_am_ling(i_am_ling) 发表:在不同的条件下，样品带有不同的电荷，所受外界的力，就不同！

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shuangleiii

第6楼2010/11/21

9点多有问题吗？我感觉我的实验太奇怪了少加点或多加点环糊精有分开趋势的峰就会不在中间分开了而是从主峰的侧边有个小峰
sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:楼主缓冲溶液的pH是多少？

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userwzy

第7楼2010/11/22

你按浓度逐增或者逐渐做下,看看有什么规律.

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poplar_yang

第8楼2010/11/23

两个亲密的峰可以分开,依靠它们的形状 - 毛细管越长浓度越大, 分辨率会更好, 峰更尖

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shuangleiii

第9楼2010/11/23

稍微改变一下浓度就没有趋势了，我重新配了一个也不行了，但是用以前配的那个还可以！！真郁闷了！！
userwzy(userwzy) 发表:你按浓度逐增或者逐渐做下,看看有什么规律.

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userwzy

第10楼2010/11/23

那样的话，我觉得你应该考虑一下配的样品溶液是不是有问题了，比如说样品被污染。
shuangleiii(shuangleiii) 发表:稍微改变一下浓度就没有趋势了，我重新配了一个也不行了，但是用以前配的那个还可以！！真郁闷了！！

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