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【资料】核酸是如何被定量的
dengfang1988
2010/11/30
私聊
其他仪器综合讨论
UV分光光度计
是一款常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。那么在试验中
UV分光光度计
又是如何定量的呢?下面我们就以核酸的定量为例来讲述
UV分光光度计
是如何定量的。
核酸的定量
核酸的定量是
UV分光光度计
使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非是一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。其实试验过程中就是这样的,常常会出现一些不确定的因素,导致试验结果的偏差,有些因素是可以避免的,然而有些因素又是不可避免的。
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莞城.XiShui
第1楼
2010/12/23
UV分光光度计是一款常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量
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