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【转帖】药典液相色谱方法的调整

省部重点实验室

2010/12/19

药典液相色谱方法的调整

• 根据药典附录“液相色谱法”规定，可调整适当参数

---调整目的：满足系统适用性的要求

---系统适用性的要求

---HPLC方法调整的考虑因素

05版药典的系统适用性要求

1、理论塔板数：

----反映整个色谱系统的状态

填料状态

管线连接

----有不同的计算方法

主要是峰宽取值方法不同

不同计算方法计算结果有差异

----影响因素：

被测组分的保留时间、进样量等

积分参数

系统死体积

测定色谱方法、样品与计算方法保持恒定，以便比较

05版药典的系统适用性要求

2、分离度：

---影响因素：

* 影响柱效的因素

色谱柱尺寸

填料性能

进样量

* 影响分离选择性的因素

流动相组成

色谱柱品牌

柱温

* 柱外体积

---有不同的计算方法，结果有差异

05版药典的系统适用性要求

3、重复性（进样精密度）：

* 外标法：对照品溶液（n：5）

峰面积RSD：2.0%

* 内标法：相当于80%，100%，120%的对照品溶液，加入规定量内标

溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子（n：6）

校正因子RSD：2.0%

* 手动进样器：定量环（满环进样：进样体积至少为3倍定量环体积）

自动进样器：准确定量范围

4、拖尾因子：

----影响因素：

* 与理论塔板数相关的因素：

色谱柱选择、流动相、进样量、积分参数等

* 与检测品种与方法相关

* 峰高法定量分析：0.95~1.05

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http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101219/3013222/

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