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【转帖】HPLC流动相溶剂的选择和缓冲液的配制-之选择

省部重点实验室

2010/12/19

液相色谱（LC）

　　HPLC流动相溶剂选择的一般原则：

　　1. 溶剂要与使用的检测器匹配对UV-Vis，主要考虑本底吸收，下面是常用溶剂在不同波长下的吸收值： 200 205 210 215 220 230 240 250

　　乙腈 0.05 0.03 0.02 0.01 0.01 <0.01

　　甲醇 2.06 1.00 0.53 0.37 0.24 0.11 0.05 0.02

　　THF 2.44 2.57 2.31 1.80 1.54 0.94 0.42 0.21

　　醋酸1% 2.61 2.63 2.61 2.43 2.17 0.87 0.14 0.01

　　磷酸0.1% <0.01

　　三氟乙酸 1.20 0.78 0.54 0.34 0.20 0.06 <0.01

　　三乙胺1% 2.33 2.42 2.50 2.45 2.37 1.96 0.50 0.12

　　研究表明，当流动相的A>0.7的时候，基线噪声会显著增加，一般选择的吸收值<0.5。当A>1.0时，基本就不能用使了。对于示差折光检测器，主要考虑样品和流动相的折光率，这里不再赘述。

　　2. 选用的溶剂粘度要低、沸点适中使用低粘度溶剂，可减小容质的传质阻力，降低柱压，利于提高柱效。从分离制备和色质连用考虑，沸点要适中，低沸点的溶剂有它的优点;但仅仅用于分析，沸点太低，反而由于溶剂的挥发，造成保留时间的变化。

　　3. 尽量不用高毒性的溶剂不只是环境，单从我们自身的安全考虑，当然用低毒溶剂最好。

　　4. 溶剂对样品有足够的溶解力样品如果不能溶解在选用的溶剂里，还怎么分析?不屑多解释。但如果样品在流动相里溶剂仍然不大，可以用样品的最佳溶剂先溶解，再用流动相稀释，就可以了。

　　知道了上面选择溶剂的一般原则，就不难理解为什么不同乙醇、丙醇做流动相的原因了，因为它们的粘度大。

　　还有丙酮，虽然粘度和毒性较低、溶解度大、极性适中，但用于它的截至吸收波长为330nm，所以不常用，如果样品的吸收大于330nm，其实用丙酮是一个不错的选择。

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1818

第1楼2010/12/20

这么详细的资料,楼主干么不写原创呢?

0

有水有渝

第2楼2010/12/20

应助达人

楼主都已经注明了转帖，就不是原创的了，而且这类的资料已经不少，要原创出新意比较难。
xyhdcm2002(xyhdcm2002) 发表:这么详细的资料,楼主干么不写原创呢?

0

luyinhu

第3楼2010/12/23

太经典了我喜欢

0

yuduoling

第4楼2010/12/30

很详细，收藏了。多谢分享

0

envirend

第5楼2015/11/16

应助达人

请教个液相问题：固定液的选择依据是“相似相容”原则，流动相要求“本底吸收小（检测器）、粘度小、毒性低、对样品有溶解性”～～固定液的相似相容与流动相对样品的溶解性，有矛盾吗？
1818(xyhdcm2002)发表:这么详细的资料,楼主干么不写原创呢?

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