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【求助】如何选择展开剂?

薄层色谱(TLC)

  • 要从细菌发酵上清液中分离某种功能物质。我用氯仿:甲醇从9:1到0:10设为展开剂做薄层层析,结果Rf值都太大,后来换用环己烷:乙酸乙酯设9:1到0:10,Rf值却过小,求助各位高手,应该怎样更有效的选择展开剂呢?还有Rf值是否0.2-0.3为好,我一直用该值的多少来衡量展开剂的好坏是否太片面了?
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  • learner1999

    第1楼2010/12/25

    应助达人

    我觉得判断分的好坏,还得依据组分的多少吧

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  • yangliguo007

    第2楼2010/12/25

    首先,搞清楚你这种功能物质的成分,然后根据其性质选择展开系统,如果有文献,最好,直接搬过来试试看,祝实验顺利。

    jefful(jefful) 发表:要从细菌发酵上清液中分离某种功能物质。我用氯仿:甲醇从9:1到0:10设为展开剂做薄层层析,结果Rf值都太大,后来换用环己烷:乙酸乙酯设9:1到0:10,Rf值却过小,求助各位高手,应该怎样更有效的选择展开剂呢?还有Rf值是否0.2-0.3为好,我一直用该值的多少来衡量展开剂的好坏是否太片面了?

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    第3楼2010/12/26

    我用氯仿:甲醇从9:1到0:10设为展开剂做薄层层析

    很奇怪,我们一般跑到1:1就可以冲柱了
    然后你跑过1:1和1:5一类的吗?
    1:1和1:5的效果基本是一样的,呵呵

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    第4楼2010/12/26

    考虑石油醚丙酮吧,呵呵

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  • 香奈儿

    第5楼2010/12/26

    用环己烷:乙酸乙酯1:5试试看呢,调节比例摸索下,最好查下文献做为参考。

    jefful(jefful) 发表:要从细菌发酵上清液中分离某种功能物质。我用氯仿:甲醇从9:1到0:10设为展开剂做薄层层析,结果Rf值都太大,后来换用环己烷:乙酸乙酯设9:1到0:10,Rf值却过小,求助各位高手,应该怎样更有效的选择展开剂呢?还有Rf值是否0.2-0.3为好,我一直用该值的多少来衡量展开剂的好坏是否太片面了?

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  • It`s me

    第6楼2010/12/26

    对,可以在环己烷:乙酸乙酯设9:1到0:10之间调节看,估计能有合适的比例的。

    香奈儿(tingtinglv) 发表:用环己烷:乙酸乙酯1:5试试看呢,调节比例摸索下,最好查下文献做为参考。

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  • 小虾米

    第7楼2010/12/26

    用下3倍原则试试

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  • dahua1981

    第8楼2010/12/26

    应助达人

    只要能分开就好,0.2-0.3只是理论上的

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  • jefful

    第9楼2010/12/26


    谢谢各位的建议。这是我用乙酸乙酯作为展开剂时的结果,我以有颜色条带最远处为溶质跑的距离计算Rf值,结果为0.24,但是从图上可以看出,绝大部分物质还在点样处,这样能选为洗脱剂吗?

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  • It`s me

    第10楼2010/12/27

    你就用乙酸乙酯连续展开10次到20次,看看能分开不,如果能分开就可以用。

    jefful(jefful) 发表:
    谢谢各位的建议。这是我用乙酸乙酯作为展开剂时的结果,我以有颜色条带最远处为溶质跑的距离计算Rf值,结果为0.24,但是从图上可以看出,绝大部分物质还在点样处,这样能选为洗脱剂吗?

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