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【求助】PCR体系求教

PCR

  • 用如下程序扩增基因，扩好多次都没结果，只有引物2聚体，大家帮看下反应程序有无问题。
    水： 12.2微升，10*buffer： 2微升，DNTP:2微升，引物F（5PM）: 0.8微升，引物R（5PM）: 0.8微升，Taq: 0.2微升， CDNA模板：2微升
    早上来老师说酶加少了，应该加2微升，引物应该提高到4微升。哪位高人看下，还有什么需要优化的？
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  • mufeng0676

    第1楼2010/12/29

    10*Buffer提高到2.5，引物分别加到1，DNTP是多少浓度的？如果DNTP浓度太高的话，Mg2+的浓度不够也是，没有产物。

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