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【求助】HPLC中保留时间前移

液相色谱(LC)

  • 各位有经验的色友们,这里有个问题想请教一下。
    我用4.6mm*33mm,3um的C18柱,流速为3,流动相为0.1%H3PO4:ACN=1:1等度洗脱,从去年8月份到现在,保留时间不断前移(主峰从2.1前移到了1.4了),而且每个峰移动大小不一样,因此做杂质时,峰的RRT老对不上,很郁闷,不知哪位大侠能帮忙解决一下,谢谢!
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  • yzl_cn

    第1楼2011/02/23

    测一下仪器流速是否稳定,另外你用了盐的缓冲液,每次有没有重新干净,检查一下你的泵。

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  • 有水有渝

    第3楼2011/02/23

    应助达人

    柱温是否有变化,可以使用相对保留时间来定位。如果柱效下降很多,建议把色谱柱充分清洗一下,可能有少量污染了。

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  • ywxk

    第4楼2011/02/23

    谢谢回答,应该与仪器关系不大,因为在两台仪器上试过,仪器间差距不大。不知道您有没有做过高通量的分析,是不是高流速短柱有什么特别要注意的地方啊!本人头次接触高通量。

    yzl_cn(yzl_cn) 发表:测一下仪器流速是否稳定,另外你用了盐的缓冲液,每次有没有重新干净,检查一下你的泵。

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  • 有水有渝

    第5楼2011/02/23

    应助达人

    高流速要注意压力,还有这个流速是标准规定是还是自己随便设置的?

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  • 问号

    第6楼2011/02/23

    泵的流量 柱温 柱效 再就是流动相 的问题吧 分别找一下原因

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  • 天马

    第7楼2011/02/23

    这么高的流速啊。没试过

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  • zhaohua8011

    第8楼2011/02/23

    流量、柱温、流动相比例是否变化,要不就是泵的问题!!!

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