【求助】梯度洗脱，不上样都为什么都会出这么多的峰？

Even you hava a low level of impurities present in the mobile phase (MP), when you flow a large volume of MP through the column,impurities will accumulate on the column when you have low percentage of organic solvent in the MP. They will be eluted when the organic percentage in the MP increases. This should be one of the potential causes.

应助达人

检测波长是多少？
仪器、柱子、水、乙腈、TFA等因素都排除了，如何排除的，比如柱子，是把柱子拆了，换上阻尼管代替后，后出来的图谱也是一样的吗，水用的是自制的，还是市售的，乙腈，TFA等更换市售的品牌了吗？

柱子残留
管路污染
试剂污染

看来要好好冲洗下系统了

波长是215nm。我用了三根不同的柱子，其中有一根还是新的，分别在两台不同牌子的高效上走过，结果还是这样，并且这其中我还用两种不同牌子的乙腈走过（一种国产的，另一种是进口的），也是这个结果。水用的是自己实验室纯水机制出来的（电阻值为18.25兆欧），今天又试了一下超市买的哇哈哈纯净水，最后也还是这个结果。现在有种这个问题根本就无解的感觉了。。。。
哎，请大侠帮我提个建议吧！！！谢谢了！！！

Good advise！Thanks！

应助达人

相同方法，流动相不加TFA的试过吗？另外还是建议不接色谱柱的情况下看看。进样器是手动的还是自动的，如果是手动的，转到另外一个位置时试试，检查一下进样器有没有污染。

哪来那么多梯度峰
比如20min-30min这一段时间，流动相比例根本没有变化过
是不可能出现梯度峰的
再说，梯度峰是不可避免的，比例变了基线肯定要变化。
LZ还是再找找流动相污染、柱子污染、流通池污染的问题

梯度峰不是这样的，这显然是污染所致