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【求助】液相条件检测 出峰问题,怎么解决??

  • shuangleiii
    2011/03/09
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 同一个样品两种方法检测结果不一致

    请教大家,同一个样品用两种液相条件检测的结果不一致(归一化法),一个色谱条件是乙腈-0.1%磷酸=40:60,主峰保留时间为4min,杂质A含量约0.15%。另一个是乙腈-水(0.4%HAC,0.1%TEA)=44:56,主峰为16min,采集时间足够长,完全可以检测到A,但是杂质A没有出峰。柱子都是C18柱,牌子不一样。
    另一个问题,做旋光测试时,同一份样品用两根长度不一样的旋光管,测出来结果偏差比较大,可能是什么原因?另外,同一批样品,配制两份溶液,旋光值测出来也不一样,为什么呢?
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  • shuangleiii

    第1楼2011/03/09

    补充:检测波长244nm,pH值分别为2.4,4.3

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  • guoke121

    第2楼2011/03/09

    你的杂质A很有可能是个离子型的化合物,你用0.1%磷酸,杂质A能出来,说明0.1%的磷酸起到了缓冲的效果,能控制住杂质A的离解,而用第二个缓冲盐没出现,说明它没起到这个效果。
    你要搞明白旋光度不等同于比旋度,旋光管的长度,溶液的浓度都会影响旋光度的值,但不会影响比旋度的值的。你问这个问题,说明你不知道比旋度的计算方法。翻翻药典你就明白了。

    提供HPLC开发与验证、LC-MS定性、GC-MS、LC-MS-MS定量、未知杂质鉴定、蛋白分子量检测等。13524366535张先生.

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  • 该帖子已被版主-xue2009加2积分,加2经验;加分理由:有道理,PH低能出峰说明是抑制了解离
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  • shuangleiii

    第3楼2011/03/09

    是我写错了,我的意思是比旋度测出来结果不一样,但是都在范围之内。

    guoke121(guoke121) 发表:你的杂质A很有可能是个离子型的化合物,你用0.1%磷酸,杂质A能出来,说明0.1%的磷酸起到了缓冲的效果,能控制住杂质A的离解,而用第二个缓冲盐没出现,说明它没起到这个效果。
    你要搞明白旋光度不等同于比旋度,旋光管的长度,溶液的浓度都会影响旋光度的值,但不会影响比旋度的值的。你问这个问题,说明你不知道比旋度的计算方法。翻翻药典你就明白了。

    提供HPLC开发与验证、LC-MS定性、GC-MS、LC-MS-MS定量、未知杂质鉴定、蛋白分子量检测等。13524366535张先生.

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  • xmqhp

    第4楼2011/03/10

    要搞明白旋光度不等同于比旋度,旋光管的长度,溶液的浓度都会影响旋光度的值,但不会影响比旋度的值

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  • 阿帕

    第5楼2011/03/11

    只能说 第二个方法选的不合理

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  • tong-hong_liang

    第8楼2011/03/15

    仪器存在误差吧

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