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【讨论】毛细管电泳基线上漂问题

毛细管电泳(CE)

  • 悬赏金额:20积分状态:已解决
  • 用的是贝克曼的CE,两次实验的结果在图中。

    上图:去年的结果,前几针倾斜,后来慢慢变成水平的直线正常了(应该是氘灯预热到稳定的过程)

    下图:今年的结果,进了好几针,基线总是呈拱形,一点变缓和的迹象都没有。去年的结果重现不出来了。

    今年实验时:毛细管预处理方法(氢氧化钠30min—甲醇30min--6omin——缓冲液60min),缓冲液都是新配的,电流也很稳定,进口的氘灯也查了才用了1600多个h,还是解决不了基线上漂的问题。
    请大家帮帮忙,集思广益。多谢了!





叮叮当当 2011/03/28

[quote]原文由 [b]jcok123(jcok123)[/b] 发表: [quote]原文由 [b]heguang(heguang)[/b] 发表: 先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。 把毛细管清洗了以后空气吹干,加电压空跑,看基线情况。[/quote] 谢谢! 试过不进样,进的是单独的缓冲液(溶解样品的)以及超纯水,基线还是呈拱形,只是没峰而已。 “把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干? 接上管子通氮气? [/quote] 走空白,基线拱形,说明和样品没有关系。问题可能是在氘灯、光路和毛细管以及缓冲液上边。 氘灯测试下能量,逼近快2000h了,稳定时间久一点看看是否飘逸严重。 光路可能性最小,最好有新毛细管活化一下和配点新的缓冲液空白运行排除一下看看。

heguang 2011/03/16

先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。 把毛细管清洗了以后空气吹干,加电压空跑,看基线情况。

cpudaxiao 2011/03/16

氢氧化钠5min—甲醇5min--水8omin——缓冲液10min 用这个程序走两次就好了。

ericwong 2011/03/18

更换一根新的毛细管试试

  • 该帖子已被版主-userwzy加2积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖
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  • cpudaxiao

    第1楼2011/03/16

    氢氧化钠5min—甲醇5min--水8omin——缓冲液10min

    用这个程序走两次就好了。

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  • heguang

    第2楼2011/03/16

    先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
    把毛细管清洗了以后空气吹干,加电压空跑,看基线情况。

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  • jcok123

    第3楼2011/03/16

    谢谢!
    试过不进样,进的是单独的缓冲液(溶解样品的)以及超纯水,基线还是呈拱形,只是没峰而已。

    “把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干? 接上管子通氮气?

    heguang(heguang) 发表:先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
    把毛细管清洗了以后空气吹干,加电压空跑,看基线情况。

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  • jcok123

    第4楼2011/03/16

    嗯 谢谢 我试试

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:氢氧化钠5min—甲醇5min--水8omin——缓冲液10min

    用这个程序走两次就好了。

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  • heguang

    第5楼2011/03/17

    放一个空瓶在仪器里,然后用空瓶冲洗毛细管,几分钟毛细管就干了。

    jcok123(jcok123) 发表:谢谢!
    试过不进样,进的是单独的缓冲液(溶解样品的)以及超纯水,基线还是呈拱形,只是没峰而已。

    “把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干? 接上管子通氮气?

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  • ericwong

    第6楼2011/03/18

    更换一根新的毛细管试试

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  • 叮叮当当

    第7楼2011/03/28

    走空白,基线拱形,说明和样品没有关系。问题可能是在氘灯、光路和毛细管以及缓冲液上边。
    氘灯测试下能量,逼近快2000h了,稳定时间久一点看看是否飘逸严重。
    光路可能性最小,最好有新毛细管活化一下和配点新的缓冲液空白运行排除一下看看。

    jcok123(jcok123) 发表:谢谢!
    试过不进样,进的是单独的缓冲液(溶解样品的)以及超纯水,基线还是呈拱形,只是没峰而已。

    “把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干? 接上管子通氮气?

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