【资料】硫磺熏蒸对菊花中有效成分含量影响研究，如何鉴别菊花是否被硫磺熏制过

　2.2 绿原酸的含量测定［1］
　　2.2.1 色谱条件及系统适用性色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 0.1 mol/L 磷酸二氢钠溶液-甲醇（70∶30）为流动相；检测波长328 nm，流速1 ml/min。此条件下绿原酸的保留时间为6.61 min。
　　2.2.2 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，置于棕色量瓶中，加水制成64 μg/ml，即得。
　　2.2.3 供试品溶液的制备取菊花粉末约2 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇100 ml，称定质量，加热回流2h，冷却，再称定质量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，蒸干，残渣加入氯仿5 ml，浸3min，弃去，加水适量溶解，转移至10 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，即得。
　　2.2.4 标准曲线的制备分别精密吸取对照品品溶液0.5，1.0，1.5，2.0，3.0 ml，定容至10 ml，摇匀。吸取以上溶液80μl，注入液相色谱仪，定量20 μl测定。以峰面积对浓度进行回归，得回归方程：Y=1 085.824 67X -1.33989（R=0.999 6），表明绿原酸在浓度0.064～0.382 mg/ml范围内线性关系良好。
　　2.2.5 精密度实验取供试品溶液，重复进样5 次，记录绿原酸的峰面积，计算RSD=1.21%，表明精密度良好。
　　2.2.6 重复性实验精密称取供试品5份，按“2.2.3”项下方法分别制成供试品溶液，进样分析，记录绿原酸峰面积，结果RSD=1.67%，结果表明本法重复性良好。
　　2.2.7 稳定性实验取同一份供试品溶液，分别在0，2，4，6，8 h测定，记录绿原酸峰面积，计算RSD=1.33%，表面样品在8h内稳定。
　　2.2.8 回收率实验精密称取供试品1.0 g，按高、中、低分别加入绿原酸，照“2.2.3”项下方法制备、测定，测得绿原酸平均回收率为97.51%，RSD=1.98%。
　　2.2.9 样品的测定分别精密称取各种样品，按“2.2.3”项下方法，制成供试品溶液，注入高效液相色谱仪进行测定，记录绿原酸的峰面积，计算含量。结果见表1。表1 各菊花中绿原酸含量测定结果（略）

　　2.3 槲皮素与木犀草素的含量测定［2］
　　2.3.1 色谱条件及系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相是甲醇-水（60∶40），用磷酸调pH值为3；检测波长253 nm，流速1 ml/min。此条件下槲皮素的保留时间为8.97 min，木犀草素的保留时间为10.72 min。

　　2.3.2 对照品溶液的制备称取干燥至恒重的槲皮素与木犀草素对照品适量，用甲醇溶解，定容至50 ml，得质量浓度分别为0.016 4，0.018 mg/ml混合对照溶液，备用。
　　2.3.3 供试品溶液的制备精密称取菊花粉末1 g，置锥形瓶中，加70%乙醇30 ml在60℃恒温水浴温萃30min，冷却，抽滤，洗涤至100 ml量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，摇匀。精密吸取5 ml溶液，加入1ml浓度为4mol/L的盐酸于80℃恒温水浴水解1h。用70%乙醇定容至10 ml，微孔滤膜滤过，即得。
　　2.3.4 线性关系的考察精密吸取对照品溶液1，2，4，6，8 ml定容至10 ml。吸取上述溶液，注入液相色谱仪，定量20μl，分析测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：槲皮素为Y=1 584.431 7X+0.70387(R=0.999 4)；木犀草素为Y=376.668 1X+0.581 2(R=0.999 6)，说明槲皮素在0.328～13.12μg/ml浓度范围，木犀草素在0.36～14.44 μg/ml浓度范围内线性关系良好。
　　2.3.5 精密度实验取供试品溶液，重复进样5 次，分别记录槲皮素和木犀草素峰面积， 计算RSD分别为1.86% 和1.91%，表明精密度良好。
　　2.3.6 重复性实验精密称取供试品5份，按“2.3.3”项下方法分别制成供试品溶液，进样分析，记录槲皮素和木犀草素峰面积，结果RSD分别为1.89%和1.77%，结果表明本法重复性良好。
　　2.3.7 加样回收率实验取一样品粉末，精密称取5份，分别加入混合标准溶液1 ml，按“2.2.3”项下方法制备、测定，测得槲皮素平均回收率为98.11%，木犀草素平均回收率为96.83%，RSD分别为1.94%和1.86%。
　　2.3.8 样品的测定各样品按“2.3.3”项下方法，制成供试品溶液，注入高效液相色谱仪进行测定，记录槲皮素和木犀草素的峰面积，计算含量。结果见表2。表2 各菊花中槲皮素和木犀草素含量测定结果（略）

2.4 总黄酮的含量测定［2］
　　2.4.1 对照品溶液的制备称取芦丁适量，用70%乙醇溶解，置50 ml量瓶中，制成浓度为0.226 mg/ml溶液，备用。
　　2.4.2 供试品溶液的制备精密称取菊花粉末1 g，置锥形瓶中，加70%乙醇30 ml在60℃恒温水浴温萃30min，冷却，抽滤，洗涤至100 ml量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，摇匀。精密吸取3 ml于10ml量瓶中，用30%乙醇定容，分别精密吸取2 ml于10 ml试管中，加5%亚硝酸钠溶液0.3 ml，振摇均匀放置6min，再加10%硝酸铝，震荡均匀，放置6 min，再加4%氢氧化钠4 ml，，振荡摇匀，用30%乙醇定容，放置10min后置比色皿中于510 nm处测定吸光值。以30%乙醇为空白溶液。
　　2.4.3 标准曲线的制备精密吸取芦丁对照液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，分别置10ml量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液0.3 ml，振摇均匀放置6 min，再加10%硝酸铝0.3 ml，振荡均匀，放置6min，再加4%氢氧化钠4 ml，振荡摇匀，用30%乙醇定容至刻度，振荡摇匀，放置10 min后采用分光光度法，在510nm处测定吸光值，以对照品浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=1.079 6X+0.032 8(R=0.9915),说明芦丁在浓度0.226～1.13 mg/ml范围内线性关系良好。
　　2.4.4 样品的测定按“2.4.2”项的方法制成供试品溶液，依法测定。结果见表3。表3 各菊花中总黄酮含量测定结果表（略）

　2.5 SO2残留量的测定［3］
　　2.5.1 对照品溶液的制备称取0.5 g亚硫酸氢钠，溶于200ml四氯汞钠吸收液中，放置过夜，上清液用定量滤纸过滤后用硫代硫酸钠标准溶液标定其浓度，再用四氯汞钠吸收液稀释成2μg/ml做标准液。盐酸副玫瑰苯胺溶液；称取0.1 g盐酸副玫瑰苯胺于研钵中，加少量水研磨使溶解并稀释至100 ml。取出20 ml于100ml容量瓶中，加浓盐酸8.0 ml混匀，待溶液由红变黄后稀释至该度备用。
　　2.5.2 供试品溶液的制备精密称取3 g样品于100 ml容量瓶中，加20 ml四氯汞钠吸收液，放置过夜，加水稀释至刻度，过滤，弃去初滤液，滤液待测。
　　2.5.3 亚硫酸氢钠标准溶液的标定吸取10 ml亚硫酸氢钠-四氯汞钠溶液于250 ml碘量瓶中，加100 ml水，准确加入20 ml0.05 mol/L 碘溶液，5 ml冰醋酸，摇匀，置暗处 2 min后，迅速以 0.1mol/LNa2S2O3标准溶液滴定至淡黄色，加0.5 ml淀粉指示剂呈蓝色，继续滴定至无色。另取 100 ml碘量瓶，准确加入 20 ml 0.05mol/L碘溶液，5 ml冰醋酸，按同一方法做试剂空白试验。
　　2.5.4 标准曲线的制备 精密吸取0.2，0.4，0.8，1.2，1.6 ml SO2标准使用液，分别置于25ml具塞比色管中，于标准管中各加入四氯汞钠吸收液至10 m，12 g/L氨基磺酸铵溶液1 m，10.4%甲醛溶液1 ml，盐酸副玫瑰苯胺溶液1ml混匀。放置20 min，室温下用比色皿以零管调零，于波长550 nm处测吸光度，绘制标准曲线。得回归方程为：Y=0.039 5X-0.0145 6，R=0. 999 6，样品在0. 4～3.2 μg/ml范围内有良好的线性关系。
　　2.5.5 样品的测定按“2.5.2”项的方法制成供试品溶液，依法测定。结果见表4。表4 不同干燥方法菊花中SO2残留量结果（略）

　3 讨论

　　由表1可知，硫熏菊花中绿原酸的含量要高于自然干燥的菊花，并且随着硫磺剂量的增多和熏蒸次数的增多，绿原酸含量也依次增高，这与菊花中存在的多酚氧化酶(PPO)有关。PPO是一类广泛存在于植物体内的能催化多酚类氧化成醌类的含铜质体金属酶，多分布于花、叶片、块茎、根等组织中。绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸，由于其分子结构中存在邻苯二酚结构，所以在有氧条件下极易被PPO氧化成醌类物质，产生褐变反应［4］。硫磺熏蒸产生大量的SO2使得菊花中亚硫酸氢盐的浓度增高，而亚硫酸氢盐如NaHSO3能够降低PPO的酶促反应强度，推迟反应时间。并且NaHSO3为还原剂，能将反应体系中的酚氧化产物醌进一步还原为酚，从而抑制了绿原酸被氧化，保证了绿原酸的含量。因而，硫熏菊花中绿原酸的含量要高于自然干燥的菊花。

　　由表2和表3可知，硫磺熏蒸后，菊花中的槲皮素和木犀草素的含量下降，总黄酮含量也下降，但降低程度与硫磺用量未见明显规律。

　　表4中，采用2g硫磺熏干后的药材中SO2残留量约为自然干燥菊花中SO2量的5倍。自然干燥的菊花中也存在微量的SO2。原因是大气中存在的SO2可以进入叶片，这是植物吸收硫营养的次要形式。此外，土壤中的硫酸盐为植物提供了丰富的SO42-，进入植物体内的硫酸根离子在5'-腺苷磷酸硫酸还原酶的作用下［5］，还原成SO32-。因此，自然干燥的菊花中SO2残留量为0.172 4 mg/g。

　　由于熏制药材所用硫磺多为天然品，含有一定量的二硫化二砷，燃烧后，二硫化二砷与空气中的氧发生反应，生成三氧化二砷，有损于人体健康,对肝肾功能不全者危害尤重［6］，同时还会使一些有效成分损失。

　　虽然硫磺熏蒸可以使菊花中的绿原酸免受酶解破坏而起到保护作用，但考虑到硫熏药材中残留的亚硫酸盐对人体造成的多种伤害，建议产地加工时应限制使用硫熏干燥法。
【参考文献】
　［1］贾凌云，孙启时，黄顺旺.八大品种菊花中不同成分的含量比较［J］.中草药，2004,35(10):1180.
　　［2］郭巧生，汪涛，程俐陶，等.不同栽培类型药用菊花黄酮类成分比较分析［J］.中国中药杂志， 2008,33(7):756.
　　［3］高明菊，张文斌，马妮，等.天麻中二氧化硫的含量测定［J］.时珍国医国药，2006,17(5):722.
　　［4］赵伶俐，范崇辉，葛红，等.植物多酚氧化酶及其活性特征的研究进展［J］.西北林学院学报，2005, 20(3): 156.
　　［5］吴宇，高蕾，曹民杰，等.植物硫营养代谢、调控与生物学功能［J］.植物学通报，2007,24(6):735.
　　［6］李林，张志杰，蔡宝昌. 硫熏对百合有效成分的影响［J］.上海中医药大学学报，2006，20(1):64.

如何鉴别菊花是否被硫磺熏制过。
菊花茶：有明目清肝的作用，有些人就干脆菊花加上枸杞一起泡来喝，或是用蜂蜜菊花茶都对疏肝解郁很有帮助。决名子茶：决名子有清热、明目、补脑髓、镇肝气、益筋骨的作用，若有便秘的人还可以在晚餐饭后饮用，对于治疗便秘很有效果。杜仲茶：杜仲具有补血与强壮筋骨的作用，对于经常久坐，腰酸背痛很有帮助.
菊花茶的作用：对眼睛的保健
菊花对治疗眼睛疲劳、视力模糊有很好的疗效，国人自古就知道菊花有保护眼睛的作用。除了涂抹眼睛可消除浮肿之外，平常就可以泡一杯菊花茶来喝，能使眼睛疲劳的症状消退，如果每天喝三到四杯的菊花茶，对恢复视力也有帮助。
很多人在买菊花时喜欢买白色的菊花，不喜欢买发黄的菊花，因为卖相不好而无人问津。其实很多人都不知道用硫磺熏制过的菊花就会呈现出白色，当然不是说所有白色的菊花都是用硫磺熏制过的。
下面就教大家如何分别菊花是否被熏制过
1，看颜色，一般没熏制过的菊花呈现黄色，而非常白的菊花多半是被熏制过的，看上去非常的好看，而且宜保存。
2，闻味道，熏制过的菊花会有一点酸味，没熏制过的菊花会有的菊花特有的淡淡的清香。
硫磺对人体的危害：
硫磺里含有铅、砷等重金属，会对人的肝脏或肾脏造成严重的影响；硫磺燃烧后能产生二氧化硫，二氧化硫也是一种致癌化学物质。这些化学物质可残留在食品表面或渗透到食品内部，给人体带来很大的危害，据报道,食品中二氧化硫含量超过0.05%就会产生令人不适的味觉。二氧化硫还很容易被湿润的黏膜吸收，进而对眼及呼吸道产生强烈的刺激作用，导致头昏、腹痛和腹泻，严重的会造成中毒。长期使用硫磺熏制过的食物，或多或少地含有硫磺化合物，不仅不卫生，还会让人慢性中毒，甚至致癌。因而控制食品中二氧化硫残留量成为硫磺熏制生产管理中至关重要的问题。
硫磺熏制是我国食品传统的加工、养护方法之一，由于其除虫防霉效果明显，可以保持食品中的水分、使外观色彩鲜艳，方便保存。而且操作简单,价廉易得,被相当多的食品生产用户特别是基层食品加工企业普遍使用。这种加工生产方法会导致食品残留大量的二氧化硫以及砷、汞等有毒有害物质。
选择买发黄没被熏制的菊花多数人还不习惯，那是因为不知道有很多白色的菊花是用硫磺熏制过的，就像很多年前大家都喜欢买白色的银耳，因为被硫磺熏制过的银耳白颜色好看。但现在如果还有白色的银耳多数人都不会去买，只会买黄色的，因为黄色的是没被熏制过的。道理是一样的，当人们知道这样东西用了对人体不好就不会再去买了。接受是要有一个过程的。

支持原创，就是想为什么现在好多东西都要用硫磺来熏，搞不懂。

不错的文章,多谢分享了

你二氧化硫测定 干吗这么复杂？？

2010版 药典附录有测定二氧化硫 你干吗不按照 那样做！

有国家标准你还参考其他的？？你思路有问题啊