【讨论】缓冲溶液的原理你知道多少呢

各组分在两相之间平衡分配的差异平衡分配可以用分配系数和分配比来衡量

在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分必要，如果PH值不恰当可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰，或肩峰，为能在定量分析中获得低的检测限，两次分析之间较低的相对标准偏差（RSD）和保留时间的重现性，尖锐的，对成的峰很必要，我们将讨论在使用缓冲液时如何选择缓冲液的PH值，以及如何选择正确的缓冲体系。

什么时候需要缓冲溶液？

在反相色谱分析中，流动相的PH值一般在2.5－7之间，当分析物在反相条件下可离解，或样品的PH值在2.5－7之外时，就需要缓冲液，在反相条件下可离解的化合物一般有氨基和羧基，他们的Pka在1－11之间，选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团处于一种形式，离子形式或中性化合物的形式，如果样品的PH值对柱子有伤害，则缓冲溶液可使其变温和或减小其危害，

如何选择缓冲液PH值

在选择缓冲液PH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个单位的值，有助于获得好的或尖的峰，从HH公式得知，溶液PH值高于或低于两个Pka两个单位，化合物99％以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰，

让我们通过一个离子来看如何选择PH值

例如苯甲酸图一显示的是他的离子形式和中性化合物的转变，苯甲酸的Pka等于4.2，理论上讲有HH公示得知，当PH值等于2.2时，99％的苯甲酸以中性化合物存在，PH值等于6.2时99%的苯甲酸以离子形式存在，所以当缓冲液PH值等于2.2时，中性化合物以羧酸形式保留于反相柱，表1列出了一般缓冲液和他们的缓冲范围。从表以知磷酸和柠檬酸缓冲液能用于PH知等于2.2。

当化合物只有氨基时，缓冲体系的选择十分简单，大多数化合物在PH值小于9时都被质子化，所以所有PH值在7或更低时均适合应用，你也许会问水的PH值大约是7，为什么还用缓冲盐，因为缓冲液有助于增加方法的可靠性，以及的尖锐性，PH值降低有助于氨基化合物保留时间减小，减小化合物与硅胶表面硅羟基的作用，而使峰更尖锐，从表1可值，任何缓冲液均可应用，但我们认为PH值等于3的磷酸钾盐最适合用于氨基化合物，

在上面两个例子中PH＝3的磷酸钾盐都能获得良好的应用，在一般情况下，他是含羧基，氨基化合物分析中最好的缓冲液，并且我们认为在氨基分析中钾盐比钠盐更好。

为离子对试剂选择缓冲液

为应用离子对试剂的方法选择缓冲液的过程是相似的，离子对试剂例如四丁基铵，十四烷基磺酸钠，在流动相中可与化合物中可离解的官能团配对，在缓冲液中以离子形式存在的化合物就需要应用离子对试剂。

应用缓冲液PH值来调节选择性

当氨基保留造势，氨基的保留随PH的减少而降低，这个特性可以用来调节选择性，如果两个化合物共流出，一个含有氨基，改变PH值可以用来分离这一物质对。由于可离解化合物的选择性依靠PH值，所以变化PH值可以用来鉴别未知化合物的官能团，如果PH值变小，出峰便快，化合物中可能存在氨基，当PH变大,化合物出峰很快，或处在死时间处，化合物可能存在的羧基离子化后比中性化合物处分快。

总结

正确选择缓冲液在反相液相色谱方法中对于优化尖峰，捡出限，和稳定的保留时间十分重要，如果你知道化合物官能团信息和Pka这一过程将十分简单。


在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分必要，如果PH值不恰当可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰，或肩峰，为能在定量分析中获得低的检测限，两次分析之间较低的相对标准偏差（RSD）和保留时间的重现性，尖锐的，对成的峰很必要，我们将讨论在使用缓冲液时如何选择缓冲液的PH值，以及如何选择正确的缓冲体系。

什么时候需要缓冲溶液？

在反相色谱分析中，流动相的PH值一般在2.5－7之间，当分析物在反相条件下可离解，或样品的PH值在2.5－7之外时，就需要缓冲液，在反相条件下可离解的化合物一般有氨基和羧基，他们的Pka在1－11之间，选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团处于一种形式，离子形式或中性化合物的形式，如果样品的PH值对柱子有伤害，则缓冲溶液可使其变温和或减小其危害，

如何选择缓冲液PH值

在选择缓冲液PH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个单位的值，有助于获得好的或尖的峰，从HH公式得知，溶液PH值高于或低于两个Pka两个单位，化合物99％以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰，

让我们通过一个离子来看如何选择PH值

例如苯甲酸图一显示的是他的离子形式和中性化合物的转变，苯甲酸的Pka等于4.2，理论上讲有HH公示得知，当PH值等于2.2时，99％的苯甲酸以中性化合物存在，PH值等于6.2时99%的苯甲酸以离子形式存在，所以当缓冲液PH值等于2.2时，中性化合物以羧酸形式保留于反相柱，表1列出了一般缓冲液和他们的缓冲范围。从表以知磷酸和柠檬酸缓冲液能用于PH知等于2.2。

当化合物只有氨基时，缓冲体系的选择十分简单，大多数化合物在PH值小于9时都被质子化，所以所有PH值在7或更低时均适合应用，你也许会问水的PH值大约是7，为什么还用缓冲盐，因为缓冲液有助于增加方法的可靠性，以及的尖锐性，PH值降低有助于氨基化合物保留时间减小，减小化合物与硅胶表面硅羟基的作用，而使峰更尖锐，从表1可值，任何缓冲液均可应用，但我们认为PH值等于3的磷酸钾盐最适合用于氨基化合物，

在上面两个例子中PH＝3的磷酸钾盐都能获得良好的应用，在一般情况下，他是含羧基，氨基化合物分析中最好的缓冲液，并且我们认为在氨基分析中钾盐比钠盐更好。

为离子对试剂选择缓冲液

为应用离子对试剂的方法选择缓冲液的过程是相似的，离子对试剂例如四丁基铵，十四烷基磺酸钠，在流动相中可与化合物中可离解的官能团配对，在缓冲液中以离子形式存在的化合物就需要应用离子对试剂。

应用缓冲液PH值来调节选择性

当氨基保留造势，氨基的保留随PH的减少而降低，这个特性可以用来调节选择性，如果两个化合物共流出，一个含有氨基，改变PH值可以用来分离这一物质对。由于可离解化合物的选择性依靠PH值，所以变化PH值可以用来鉴别未知化合物的官能团，如果PH值变小，出峰便快，化合物中可能存在氨基，当PH变大,化合物出峰很快，或处在死时间处，化合物可能存在的羧基离子化后比中性化合物处分快。

总结

正确选择缓冲液在反相液相色谱方法中对于优化尖峰，捡出限，和稳定的保留时间十分重要，如果你知道化合物官能团信息和Pka这一过程将十分简单。

果然详尽，复复制黏贴了两次！
咯咯

很不错，正需要，非常感谢。

惭愧，粘贴的时候当时没注意

真的很详细,以后会用到,收藏了.