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样品浓度大小结果不一样

  • 第八块腹肌
    2011/07/07
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 我今天测了一个样品,平常都是50mg左右样品加1ML四氢呋喃,今天不小心加了2ML,测了一次,不放心又重新加1ML测了一次,测试结果不一样哦,加2ML的60万分子量保留时间居然没出峰,不知道什么原因
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  • 二头

    第1楼2011/07/08

    能上个对比图看看嘛?

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  • 老多_小多

    第2楼2011/07/08

    就算多加了试剂,没出峰不太可能呀,总不至于太稀了吧

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  • 小不董

    第3楼2011/07/08

    应助达人

    你的意思是你平时溶解的样品是50mg/ml, 今天配制的溶液是25mg/ml, 没有信号,然后又加了1ml溶剂,还是说重新配制1ml的溶液,测试结果和25mg/ml 的结果不一样?
    楼主还是把问题说清楚明白一点。
    50mg/ml,做GPC,你用几个柱子?进样量为多少?浓度太多了,很可能已经超过了柱子的载荷,测量本身就有问题,一般控制在5mg/ml以内,使用两个GPC色谱柱,进100ul为例。

    第八块腹肌(nyzhl04152) 发表:我今天测了一个样品,平常都是50mg左右样品加1ML四氢呋喃,今天不小心加了2ML,测了一次,不放心又重新加1ML测了一次,测试结果不一样哦,加2ML的60万分子量保留时间居然没出峰,不知道什么原因

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  • 第八块腹肌

    第4楼2011/07/11

    我们3根柱子,标液是50mg/10ml配置的,所以我们的样品一般取6mg左右,加1ml四氢呋喃,进样25ul。第一张图是第一次做的,浓度有点低,大约是第二张图的1/3~1/2。低分子量不明显,高分子量不一样,不知道什么原因?我同事说可能是仪器没走稳,我不太赞同,但也不知道什么原因

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  • 二头

    第5楼2011/07/12

    第一个图其实是出现了高分子量的,但是浓度很低所以基本没峰,我是怀疑你的样品溶解的不好,尤其是高分子端。直接排阻或过滤了。最好重新做样,验证一下。

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  • zhuzhuluoluo

    第6楼2011/07/14

    我的样品谱图跟楼主的一样,各个峰之间分不开,我也想这样强制垂直拉下去积分,不知道在积分方式中应选择哪些参数?有知道的同学能告知一下吗?

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  • wyxyx

    第7楼2011/08/24

    我也曾出现过类似情况,浓度相差较大时,分子量相差很大

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  • ydzcy

    第8楼2011/12/13

    浓度越大,分子之间的相互作用越强,影响洗脱时间.做GPC要注意在检测器有响应的时候,浓度要尽量的低.GPC是只考虑分子尺寸的,其它因素要尽量降低.

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