仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

有没有人用液质测多肽的,测量多肽样品稀释度多少,加酸多少?

  • piaolingyu
    2011/08/19
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 我是刚开始做液质
    用的仪器是Thermo的液质联用仪
    主要用于测定多肽的分子量
    问题是现在不知道多肽样品的稀释度多少最合适,
    样品中加多少的乙酸使电离度最好
    麻烦各位
    如果有人刚好做这方面的话
    告知一下
    不胜感激
    +关注 私聊
  • pazuzu

    第1楼2011/08/20

    帮顶一下,我只做过一次,加了大概0.1%的甲酸,建议你自己多试试,再来跟大家分享一下,不用接色谱柱,很快的。

0
  • 该帖子已被版主-nankingee加2积分,加2经验;加分理由:感谢交流
    +关注 私聊
  • catty125699

    第2楼2011/08/22

    0.1%甲酸,浓度建议从小试起

0
    +关注 私聊
  • hjb0114

    第3楼2011/08/23

    建议从0.01%开始,慢慢来。肽类药物在碱性条件下一般信号都不好,酸过多的话也会抑制信号

0
    +关注 私聊
  • piaolingyu

    第4楼2011/08/24

    谢谢了,我加的是0.1%的乙酸。那肽类浓度大概多少合适呢,能否说下。我做的肽类浓度是10-50微克每毫升

    hjb0114(hjb0114) 发表:建议从0.01%开始,慢慢来。肽类药物在碱性条件下一般信号都不好,酸过多的话也会抑制信号

0
    +关注 私聊
  • chenrain

    第5楼2011/08/24

    我不太明白哦,如果是质谱,lz的这个样品浓度已经完全可以了啊。
    lz想问的是做液质的浓度么?
    我前几天刚好也是用液质分离了一个多肽样品,浓度大概是0.1mg/ml,上样10ul,在色谱上的响应值不是很高,几十mAU。
    联用的流动相一开始用的0.1%TFA,对质谱信号抑制很严重。
    后来改用0.025%,信号还行,不过正在考虑是不是换用其它有机酸。

0
  • 该帖子已被版主-nankingee加2积分,加2经验;加分理由:thanks for u share
    +关注 私聊
  • piaolingyu

    第6楼2011/08/26

    是啊,是想问做液质的浓度,
    我昨天做了一下,如果只做质谱的,1μ g/ml的样品加0.1%的酸也可以做出来,只是感觉效果不好,可能是我的多肽的纯度不怎么好吧。
    液质联用的,样品浓度0.1mg/ml会不会高了啊
    这个我要试试,因为我们的机器还差个色谱柱没有买回来。

    chenrain(chenrain) 发表:我不太明白哦,如果是质谱,lz的这个样品浓度已经完全可以了啊。
    lz想问的是做液质的浓度么?
    我前几天刚好也是用液质分离了一个多肽样品,浓度大概是0.1mg/ml,上样10ul,在色谱上的响应值不是很高,几十mAU。
    联用的流动相一开始用的0.1%TFA,对质谱信号抑制很严重。
    后来改用0.025%,信号还行,不过正在考虑是不是换用其它有机酸。

0
    +关注 私聊
  • piaolingyu

    第7楼2011/08/26

    谢谢了,流动相我也正打算用0.1%的TFA。等我的柱子到了,测出来真如你所说,那估计也行把TFA的浓度降低了
    以后这方面的多交流交流啦。。

0
    +关注 私聊
  • steven_sela

    第8楼2012/12/03

    我今天也做了个多肽的样品,没接色谱柱,流动相加了0.1%甲酸。但+-模式都扫不出我要的分子量。后来直接用100%乙腈情况也差不多。求问是不是甲酸加多了抑制了它的电离?还是我该改些参数?

    pazuzu(pazuzu) 发表:帮顶一下,我只做过一次,加了大概0.1%的甲酸,建议你自己多试试,再来跟大家分享一下,不用接色谱柱,很快的。

0
    +关注 私聊
  • 第9楼2012/12/06

    0.1%-1%都不会抑制电离。你用针泵进样的,还是自动进样器?浓度是不是太低?

0
    +关注 私聊
  • lics05

    第10楼2012/12/14

    首先多肽样品尽量不含盐,加甲醇至50%,醋酸至1%上样试试

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...