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液质方法开发时,LC梯度的优化

液质联用(LCMS)

  • 大家在做液质方法开发时,对LC梯度设置有什么见解?
    比如:
    A
    H2O BACN


    0.01min 90 10

    0.6min 90 10

    1.6min 10 90

    2.0min 10 90

    2.1min 90 10

    2.5min 90 10
    对这个梯度,你一般会选择哪一段时间作为化合物的出峰时间?

    讨论:1.认为出峰时间适合优化在,0.6-1.6min,梯度洗脱增强,峰型好;
    2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min,高有机相,雾化好,响应高,精密度好。

    大家都是怎么考虑的?或者有经验的给点原理性解释?
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  • Charles911

    第1楼2011/09/16

    您这是HILIC柱子用到的程序吗??还是您A和B上面标示弄反了啊?1min时间增加这么快啊?做残留的话,估计基质效应很强啊

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  • pazuzu

    第2楼2011/09/16

    我觉得1+2都可以啊,CAN是什么?

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  • 挣点钱

    第4楼2011/09/16

    对了,是弄反了!

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  • 挣点钱

    第5楼2011/09/16

    在一些常规化合物中,可能并不需要去考虑这些。
    在方法开发时,什么是你优先考虑?在遇到一些拖尾严重的化合物时,又没有合适的色谱柱时,你会怎么优化LC呢?
    希望大家可以分享一下经验,共同讨论讨论。

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  • 胜邪

    第6楼2011/09/16

    如果方法开发时遇见峰拖尾,通常简单判断一下原因,是否是色谱柱走样时间长了,脏了;还是开发质谱方法后,化合物在管路中残留(有的化合物喜欢残留);排除后,正常出峰拖尾严重,可能是流动相PH值不匹配,先调梯度看能不能解决,再用常见的FA,醋酸铵,氨水之类的摸一摸化合物的酸碱性,不行,还可以试挥发性离子对试剂。
    有时换根类型匹配的柱子就可以解决,还是换柱子方便啊,,,,

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  • wwang815

    第7楼2011/09/18

    这个梯度很有意思,起始的流动相配比是多少,为什么要加一个0.01min90:10的流动相配比?在遇到严重拖尾时可以考虑用缓冲溶液来调整峰型,乙酸,甲酸,在不连质谱的情况下可以加磷酸效果可能会更好。

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  • Longer

    第8楼2011/09/27

    回7楼:他这是岛津的液相,起始都设置为0.01.相当于0

    回楼主:讨论:1.认为出峰时间适合优化在,0.6-1.6min,梯度洗脱增强,峰型好;

    2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min,高有机相,雾化好,响应高,精密度好。


    个人认为0.6-1.6min并不合适,应该设为1.2-1.6min,0.6min时有机相比例10%雾化肯定不好,没人会让峰那时候出来,1.2min时有机相比例接近60%雾化一般不成问题。1.6-2min时候峰形一般也不会差。
    所以总结应该是1.2-2min都可以,当然可根据具体情况再适当调节梯度,只可意会不可言传了就。


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  • wuyuandaai

    第9楼2011/09/27

    岛津的液相时间0.01是相当于零,我觉得目标物的保留时间要是出在1.6-2.00之间是最稳定的!当然你一个方法里面要是走很多化合物的话,有的保留时间可能会出现在0.6-1.6之间!我觉得0.6-1.6之间的时间你可以在缩短一些都可以!保证更多的目标物能在雾化比较好的高比列有机相的时间出峰!感觉你的这个梯度可以再适当的调节优化!

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  • wuyuandaai

    第10楼2011/09/27

    ACN是乙腈!

    pazuzu(pazuzu) 发表:我觉得1+2都可以啊,CAN是什么?

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  • 挣点钱

    第11楼2011/09/27

    说的比较细。漂亮的数据和图谱,是雾化和稳定性的综合考虑的情况下得到的。
    对于质谱这样的高灵敏度的仪器,也给追求更高质量的数据要求带来了可能。

    Longer(ptwx) 发表:回7楼:他这是岛津的液相,起始都设置为0.01.相当于0

    回楼主:讨论:1.认为出峰时间适合优化在,0.6-1.6min,梯度洗脱增强,峰型好;

    2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min,高有机相,雾化好,响应高,精密度好。

    个人认为0.6-1.6min并不合适,应该设为1.2-1.6min,0.6min时有机相比例10%雾化肯定不好,没人会让峰那时候出来,1.2min时有机相比例接近60%雾化一般不成问题。1.6-2min时候峰形一般也不会差。
    所以总结应该是1.2-2min都可以,当然可根据具体情况再适当调节梯度,只可意会不可言传了就。

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