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用紫外可见分光光度计测浓溶液线性透过率时的问题

紫外可见分光光度计(UV)

  • 用紫外可见分光光度计测一个浓溶液的线性透过率,浓度大概在0.75 mol L-1。这个样品的吸收谱范围在400-700,在1064nm肯定没有吸收。但是测试出现下面的问题:
    1、用1cm池子测得时候,在1064nm波长的线性透过率只有45%,但是相同的溶液换到1mm的池子在1064nm的透过率就有95%了。
    2、把这个溶液稀释一倍再用1cm池子测,透过率又到了90%以上。
    疑问:
    1、溶液在1064nm无吸收,1cm池子中线性透过率的损失应该不是线性吸收造成的,那么应该是什么原因?散射?
    2、如果是散射,那么为什么相同的溶液在1mm池子中损失这么少?溶液对光的散射跟厚度有什么样的关系?


    这是我把透过率转换成Abs的图,浓度很大了,0.75M,应该不是太准确,但是意思一样。图中两条线是同一个溶液在1cm和1mm池子里的吸收,1mm池子里在1064nm处明显几乎没有吸收了,而1cm池子里在1064nm处则有很大的吸光度值。这个样品在这个波长下应该没有吸收,所以这里测出来的吸收值是不是应该归因于散射造成的?那么为什么1mm池子里的散射却不明显?
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  • ldgfive

    第1楼2011/11/09

    应助工程师

    透过率看不太懂,最好转换为Abs再分析,结果更明了

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  • tjuwlh

    第2楼2011/11/09

    已经转换并作说明 见主帖 谢谢解答

    ldgfive(ldgfive) 发表:透过率看不太懂,最好转换为Abs再分析,结果更明了

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  • wahaha1210

    第3楼2011/11/10

    朗伯比尔定律:A=kbc,A:吸光度,b:比色皿光程长,C:浓度
    吸光度和光程长成正比,用长光程的比色皿测量吸光度自然大些

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  • wahaha1210

    第4楼2011/11/10

    用光程长的比色皿,光的散射损失自然大些,这种情况下,可能用积分球做散射损失没这么大

    wahaha1210(wahaha1210) 发表:朗伯比尔定律:A=kbc,A:吸光度,b:比色皿光程长,C:浓度
    吸光度和光程长成正比,用长光程的比色皿测量吸光度自然大些

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  • tjuwlh

    第5楼2011/11/10

    谢谢你的回答。
    朗伯比尔定律我知道,吸光度与光程有关这个是很自然的。
    但是我的样品稀溶液(10-5 M)测试吸收谱时,吸收谱范围在400-700nm,700之后没有吸收。现在我测透过率时用的是0.75 M的溶液,其浓度应该远超过朗伯比尔定律的适用范围,而且根据我之前做过的其他样品的经验,在1064nm这些样品应该是没有吸收的,透过率应该都接近100%。所以我在想这个样品浓溶液在1064nm线性透过率的损失是不是应该归因于散射造成的损失。

    wahaha1210(wahaha1210) 发表:用光程长的比色皿,光的散射损失自然大些,这种情况下,可能用积分球做散射损失没这么大

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  • tutm

    第6楼2011/11/10

    从两种光程的比色皿测试结果看,没什么问题呀。800nm处,1cm的吸光度4不到些,1mm的大约也是0.4不到些.

    一般吸光度与溶液浓度成正比,你的样品稀溶液(10-5 M)测试吸收谱时,各个波长下的吸光度差不多只有现在浓溶液吸光度的1-7万分之一。就按你上图的1064nm,吸光度约0.7来算,稀溶液在这个波长下的吸光度只有0.00001-0.00007,透光率在99.984-99.998%。一般分光光度计只有3位有效数字,也许就当100%了。

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  • zwyu

    第7楼2011/11/10

    用积分球测一下漫透射,结论可能大不相同。

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  • tjuwlh

    第8楼2011/11/11

    但我把这个浓溶液稀释一倍之后,也就是浓度变成一半后,在1064nm的透过率却一下子上升到90.3%,换算成吸光度也就有0.04左右,稀释之前吸光度在0.7左右,这也不太符合浓度的关系吧?所以我觉得还不是吸收的问题?

    tutm(tutm) 发表:从两种光程的比色皿测试结果看,没什么问题呀。800nm处,1cm的吸光度4不到些,1mm的大约也是0.4不到些.

    一般吸光度与溶液浓度成正比,你的样品稀溶液(10-5 M)测试吸收谱时,各个波长下的吸光度差不多只有现在浓溶液吸光度的1-7万分之一。就按你上图的1064nm,吸光度约0.7来算,稀溶液在这个波长下的吸光度只有0.00001-0.00007,透光率在99.984-99.998%。一般分光光度计只有3位有效数字,也许就当100%了。

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  • tutm

    第9楼2011/11/11

    要证实是不是光散射引起的,如果有条件可以用荧光光度计测一下看看,将激发波长和发射波长设置成一样波长,看看不同浓度溶液的入射光垂直方向的散射光强度有没有变化,但是可能最高只能测到900nm

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