Agilent 高效液相色谱仪sop

我把它贴出来，里面的各个步骤介绍的很详细，需要编写的版友可以参考噢！自己用的液相色谱自始至终只用一种流动相，所以操作起来的话会简单很多，不过SOP还是很有必要的，有了这一份sop每个人的操作间的差异就会降到最低


Agilent 高效液相色谱仪sop
1.0 目的PURPOSE
建立Agilent 高效液相色谱仪的操作与维护规程,确保仪器的准确操作,以获取准确的分析数据。
2.0 适用范围SCOPE
适用于Agilent 高效液相色谱仪的操作及维护。
3.0 定义DEFINITIONS
4.0 职责RESPONSIBILITIES
QC主管 确保分析员接受本程序培训。
QC分析员 应严格按照本程序执行。
QA 监督本IOP的执行。
5.0 程序PROCEDURE
5.1 仪器组成
安捷伦高效液相色谱仪由脱气机，输液泵，柱温箱，自动进样器，检测器及系统软件组成。
5.2 操作程序：
5.2.1流动相的准备
将去离子水和有机溶剂分别用0.45um微孔滤膜过滤，除去颗粒性杂质，倒入贮液瓶，超声波脱气
15分钟后，将之放置在仪器的试剂架上。
5.2.2开启稳压电源，然后依次开启各组件的电源开关及计算机电源开关，待仪器通过自检后，在计算机 "Windows"程序中，对"Instrument 1 online" 轻击二次，即进入在线工作站应用程序。
5.2.3方法编辑和参数设定
5.2.3.1 建立方法 在"Method & Runcontrol" 画面下，展开"Method"菜单,选择 "Save Method as" 条目，画面展开后，输入方法文件名， "OK" 确认，即建立了以原程序初始设定参数为条件的方法。
5.2.3.2方法参数条件的编辑 展开"Method"菜单，选择"Load Method"，选择欲编辑的方法文件名,使该方法进入当前使用状态。展开"Method"菜单，选择"Edit Method"，轻击鼠标，在需要编辑的条目前面
框内划"×"。"OK"确认后，即进入分项具体编辑画面。
5.2.3.3在"Method information" 画面下，输入方法提要、适用对象、柱子型号、编辑日期及操作人
等内容，"OK" 确认。
5.2.3.4在泵参数 “Pump Flow、Solvent％、 Pressure”画面下，设定流速、各通道溶剂比率、压力（高限和低限）等参数。 梯度洗脱时， 在梯度时间表（time table）内，设定起始时间和起始溶剂比率、
终止时间和终止溶剂比率、流速等。
5.2.3.5在柱温" Heater "画面下，设定柱箱温度。
5.2.3.6 在检测器参数 "UV Signal" 画面下,设定检测波长、信号采集时间，最小峰宽，信号响应值，
基线自动平衡参数等条目， "OK" 确认。
5.2.3.7 在“Signal Details”画面下，选"Add to Method"条目,设定信号采集、积分的详细参数，以及信
号通道开启时间、终止时间和延长时间。
5.2.3.8在 "Edit Integration Events" 画面下，编辑积分参数。如负峰积分、开启和终止时间、溶剂
峰、肩峰处理时间、基线选择、最小峰宽、识峰域值等。
5.2.3.9 在 “Specify Report”项下，设定报告格式。如在 “Style”中选择"Chrom+Short"，则打印出色谱图和简要的数据报告。选"Performance"，可打印出色谱峰和柱性能的完整报告。在 "Quantitative Results"中选择计算方法(百分比法、内标法、外标法等）、数据类别（峰高或面积）、峰确认方法（保留时间或信号识别）等。在 "Chromatogram" 项下选择色谱图大小、式样及峰标注内容（化合物名或保留时
间）等，"OK" 确认。
5.2.3.10 方法的存贮 展开 "Method" 菜单，选择 "Save Method" 将上述编辑的方法存盘。
5.2.3.11 内存方法的调用 对于已经编辑并存盘的方法，开机进入应用程序后，在 "Method ＆ Runcontrol" 画面下，展开 "File" 菜单，选择 "Load" 项，输入方法名，"OK"确认，使该方法进入当前使用状态。已进入当前状态的方法，若需要修改参数，可展开 "Instrument" 菜单进行。
5.2.4自动进样序列表及数据文件的设置
5.2.4.1点击“SEQUENCE”下拉式菜单,选取“SEQUENCE PARAMETERS”,设置数据保存方式及保存文件名,若选用“AUTO”则数据按序自动保存, 若选用“PREFIX/COUNTER”则需重新设定数据文件编码,以
区别于以前的数据文件.设置好后,点击“OK”标识,返回主界面。
5.2.4.2再次点击“SEQUENCE”下拉式菜单, 选取“SEQUENCE TABLE”进入样品序列设置界面,按进样顺序设置“LOCATION”-样品瓶位置, “SAMPLE NAME”-样品名称, “METHOD NAME”-方法文件名, “INJ/LOCATION”-进样次数, “SAMPLE AMOUNT”-样品重量, “INJ VOLUME”-进样体积等参数.设置完毕后,
点击“OK”标识, 返回主界面。
5.2.5 样品测定与数据报告
5.2.5.1 启动泵（按泵的 [ON/OFF] 键）和检测器（按检测器的[ON/OFF] 键）。
5.2.5.2 待基线平稳，"Run Status"画面出现"Ready" 信号后，即可点击“RUN CONTROL” 下拉式菜单,选择“RUN SEQUENCE”,自动进样器将按“SEQUENCE TABLE”所设的瓶号依次进样。
5.2.5.3 测定完毕，从"View" 菜单中，选择 "Data analysis" 条目，进入数据分析画面，展开 "File" 菜单。选择 "Load Signal"，可以调用任何一个样品数据文件，展开色谱图。可选择 “Integration”， 进行手动积分处理；也可选择 "Calibration" 建立标准曲线；也可选择"Report"， 打印处理后的数据报告。
5.2.6关机
5.2.6.1样品测定完毕，在 “Instrument” 菜单下设定各通道溶剂比例，用甲醇对色谱柱进行清洗。
5.2.6.2 柱子冲洗完毕后，轻击系统“OFF”键，停止各组件的运行，关闭主操作界面，最后关闭仪器
各组件的电源开关。
5.2.7 每次分析样品之前必须用已知含量的参照样对仪器进行校验,当实测与标值的相对偏差<0.3%
时可进行样品测试,否则必须对系统进行调整,使其达到规定要求。
6.0 注意事项及维护NOTICE AND MAINTENANCE
6.1 配置不间断电源及稳压电源，以免电源突开或停时引起烧坏。
6.2 如不做分离、检测，应将紫外检测器关闭，以延长紫外光源寿命。
6.3 全部测定完毕后，用适当的溶剂冲洗泵、色谱柱和检测器。
6.4 按国家技术监督局应定期检定，应符合规定。
6.5 操作之前检查仪器各部件是否运作正常、管路为无死体积连结，流路中无堵塞与漏液、气泡。
6.6 高纯度的试剂配制流动相，配制好流动相应用0.45um滤膜过滤。
6.7 压力表无压力波动，不稳定、压力过高时，要停机进行检查。
6.8 仪器要放在远离磁场、温度0～45℃，湿度0～80%地方。
6.9 上色谱柱时，不要用力过大，以不漏液为准。
7.0 参考文件REFERENCE
8.0 附录APPENDICES