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液相色谱相对保留时间异常

  • 有水有渝
    2011/12/20
  • 私聊

液相色谱(LC)



  • 如上两图为不同分析时间,相同分析方法,检测的是有机合成反应液,反应条件相同。
    结果两图在4.8、5.2分钟的保留时间差不多,其中4.8分钟为原料,但最大峰(主成分峰)第一个在8.6,第二个在8.1,相差很大。
    色谱条件为0.01M磷酸盐缓冲液-甲醇,梯度洗脱,有柱温箱。进样体积相同,10uL,从第一个图上看,主峰在梯度开始前就出来了,所以几乎没有受到梯度的影响。
    如果以4.8分钟的原料峰作为对照峰,那第一个图的最大峰相对保留值为1.7636,第二个图的最大峰相对保留值为1.6765,两者相对保留值相差4.9%,保留时间绝对差值0.432min,是什么因素导致相差如此之大,如果有这种情况,那欧洲药典上常用相对保留值来定位的方法是否可行?
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  • 有水有渝

    第1楼2011/12/20

    应助达人

    其中20.219峰与19.911峰为同一个物质,但两者相差的绝对值为0.308,保留时间约为主成分峰的2.5倍,相对保留时间误差却比主成分峰小。

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  • fengmo4668

    第2楼2011/12/20

    梯度对前一针的主峰没有影响,但可能对第二针的主峰有影响啊。

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  • liufeilzu

    第3楼2011/12/20

    楼主后面梯度平衡时间只有分钟吗?建议延长到10-15分钟

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  • 有水有渝

    第4楼2011/12/20

    应助达人

    可能是没有明白,上面两个图不是同一天检测的结果。上一针对下一针没有影响,梯度平衡时间足够,同一天内分析时间的重复性没有问题,同时如果影响应该是整体影响,而不是单对其中一个峰影响。

    liufeilzu(liufeilzu) 发表:楼主后面梯度平衡时间只有分钟吗?建议延长到10-15分钟

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  • 蓝人

    第5楼2011/12/23

    应助达人

    谨记哈子.

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:梯度对前一针的主峰没有影响,但可能对第二针的主峰有影响啊。

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  • fengmo4668

    第6楼2011/12/23

    如果是日间的对比,就要考虑流动相对主峰保留时间的影响。
    不知你的流动相是同一次配制的流动相,还是两次配制的?

    也就是说,会不会是流动相组份比例的改变引起的保留时间的差异?

    有水有渝(xky0230699) 发表:可能是没有明白,上面两个图不是同一天检测的结果。上一针对下一针没有影响,梯度平衡时间足够,同一天内分析时间的重复性没有问题,同时如果影响应该是整体影响,而不是单对其中一个峰影响。

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  • fengmo4668

    第7楼2011/12/23

    (⊙v⊙)嗯?
    什么意思呢?
    不同意我的判断吗?

    Blue-man(yuxiaofeng86) 发表:谨记哈子.

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  • angelchem

    第8楼2011/12/23

    一有可能是平衡时间短,二是看你手动还是自动进样,手动误差大

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  • 有水有渝

    第9楼2011/12/23

    应助达人

    不管是什么影响,但影响的不是整体,或者说对各个峰的影响程度有差异,差异没有方向性,如都提前或都延后。

    gchen521(gchen521) 发表:一有可能是平衡时间短,二是看你手动还是自动进样,手动误差大

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  • tangtang

    第10楼2011/12/23

    两天的流动相是否有区别,比如pH?实测一下数据。

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