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普通液相配窄口径柱子合适吗？

论坛版主招募|新窦

2012/02/19

液质联用（LCMS）

普通液相HPLC，MS分析，一直以来都是用的4.6口径的柱子，尝试过好多次改用2.1的柱子，但做出来的要么谱图峰形很不好，要么灵敏度差了很多级，使用梯度的话分析平衡时间都得加长。窄口径的色谱柱就不适合用在普通液相上么

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tangtang

第1楼2012/02/19

新窦老师好。

可能需要把液相管路换成细一点的，流动池也要换成半微量的。

0

happy爱米粒

第2楼2012/02/19

有句话好像是这样说的，UPLC以小颗粒填料技术为基础，但是仅有小颗粒填料并不能构成UPLC系统

0

continuum

第3楼2012/02/21

不是这样说的

UPLC 的差异是耐压

所以当然小颗粒填料没办法达成 UPLC系统

光是小颗粒加上也要达到一般流速

这个压力就让一般 HPLC受不了

不然就是一般的 peek通路或是接头承受不了

一般 HPLC用2.1是可行的

不过就是要留意整套系统的 dead volume

换小管径管路

bypass不需要的额外管路 ...

而且理论上同样注射量 2.1所得到讯号应该是比 4.6高的

不过要考虑梯度

如果真的怕麻烦

就用isocratic 看看
木有才(xgy2005) 发表:有句话好像是这样说的，UPLC以小颗粒填料技术为基础，但是仅有小颗粒填料并不能构成UPLC系统

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happy爱米粒

第4楼2012/02/21

楼上说的貌似跟我说的并不冲突啊，呵呵

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netsking

第5楼2012/02/24

一般的HPLC是可用的, 主要是看是什么样的混合器, 如果是泵前混合就不行, 如果是泵后混合就可以. 象Shimadzu的二元泵后混合UFLC, 就可以用2.1的柱子, 没有一点问题. 而Waters 600四元泵前混合, 就不行.就象你说的是因为Dead Volume的缘故.
continuum(continuum) 发表:不是这样说的

UPLC 的差异是耐压

所以当然小颗粒填料没办法达成 UPLC系统

光是小颗粒加上也要达到一般流速

这个压力就让一般 HPLC受不了

不然就是一般的 peek通路或是接头承受不了

一般 HPLC用2.1是可行的

不过就是要留意整套系统的 dead volume

换小管径管路

bypass不需要的额外管路 ...

而且理论上同样注射量 2.1所得到讯号应该是比 4.6高的

不过要考虑梯度

如果真的怕麻烦

就用isocratic 看看

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peterhello

第6楼2012/02/24

因为柱体积下降了,柱前死体积的影响会更大,所以尽量减少管路体积,流速最好能走到0.5ml/min
新窦(capinter) 发表:普通液相HPLC，MS分析，一直以来都是用的4.6口径的柱子，尝试过好多次改用2.1的柱子，但做出来的要么谱图峰形很不好，要么灵敏度差了很多级，使用梯度的话分析平衡时间都得加长。窄口径的色谱柱就不适合用在普通液相上么

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