仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

非无菌产品的细菌测定方法

  • 去年冬天
    2012/03/10
  • 私聊

食品毒素/微生物检测

  •                

    1、目的:

    判明产品被细菌污染的程度,确保出厂产品符合客户要求。


    2、范围:



    本法适用于水溶性乳剂半固体状颜料中非无菌产品的细菌测试

    3、设备和材料:

    3.1高压蒸气灭菌炉;

    3.2臭氧消毒箱;

    3.3培养箱30℃35℃

    3.4恒温水浴锅46℃±1℃

    3.5冰箱;

    3.6天平;

    3.7 三角瓶;

    3.8灭菌刻度吸管(1ml.10ml)或一次性吸头(1ml.0.1ml);

    3.9灭菌平皿(直徑9cm);

    3.10吸耳球或移液枪

    4、培养基和试剂:

    4.1Caseinsoya bean digest agar胰酶大豆琼脂);

       成分:Pancreatic digest of casein(胰蛋白胨)15.0g

    Papaicdigest of soya bean(大豆蛋白胨)5.0g

    Sodiumchloride(氯化钠)5.0g

    Agar(琼脂)15.0g

    Purifiedwater 1000 ml

       制法:胰酶大豆琼脂干粉培养基按产品标签说明加与适量纯水中,溶解混匀后至高温灭菌锅中121℃灭菌15分钟备用。

    4.2 0.85﹪生理盐水;

    制法:称取8.5gNaCL溶于1000ml蒸馏水中,121℃20分钟高压灭菌,储存备用。

    4.3 75%乙醇;
    +关注 私聊
  • 去年冬天

    第1楼2012/03/10

                   

    5、样品的采集:

    用无菌药匙混匀称取10g,加到90ml灭菌生理盐水的三角瓶中,充分振荡混匀。

    6、操作步骤:

    6.1用灭菌吸管吸取110稀释的检样2ml,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1ml另取 1ml注入到9ml灭菌生理盐水试管中,更换一支吸管,并充分混匀,使成1100稀释

    液。吸取2ml,分别注入到两个平皿内,每皿1ml。如样品含菌量高,还可再稀释成

    11000,110000等,每种稀释度应换1支吸管;

      •         6.2        将熔化并冷却至4546℃胰酶大豆琼脂培养基倾注平皿内,每皿15-20ml,另倾               

               
      •                 注一个不加样品的灭菌空平皿,作空白对照。随即转动平皿,使样品与培养基充分混合

           


    均匀,待琼脂凝固后,翻转平皿,30-35℃培养箱内培养35天,观察并计数。



      •    

    7菌落计数及报告方法:



    7.1作平皿菌落计算时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各

    平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数。在求同稀释度的平均数时,若其中

    一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿作为该

    稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均

    匀,则可将此半皿计数后乘以2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数;



      • 若所有稀释度均不在30-300区间。如均大于300,则取最高稀释度的平均菌落数乘

           


    稀释倍数报告之。如均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。如

    菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之间,则应以最接近300

    30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1

    以最低稀释倍数报告之;

    7.3不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本

    接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,则应视为检验中的差错;

0
    +关注 私聊
  • 去年冬天

    第2楼2012/03/10

                   

    7.4菌落数的报告按国家标准方法规定菌落数在1~100时,按实有数字报告,如大

    100时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算。固体检样以克

    g)为单位报告,液体检样以毫升(ml)为单位报告,表面涂擦则以平方厘米(cm2

    报告;


    8、備注:



    8.1供检样品应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂,在检验前不得启开,以防再

    污染;

    8.2在检验过程中,从开封到全部检验操作结束,均须防止微生物的再污染和扩散,所用

    器皿及材料均应事先灭菌,全部操作应在无菌室内进行。或在相应条件下,按无菌操

    作规定进行;

    8.3所采集的样品应具有代表性,一般视每批样品数量大小,随机抽取相应数量的包装单

    位。检验时取10g10ml.包装量小的样品,取样量可酌减;

    参考文献:国家标准化妆品细菌总数的测定GB7918.2

    欧洲药典(EUP2.6.12部分(非无菌产品的细菌计数测试

    美国药典(USP)第61部分(非无菌产品的细菌计数测试

    英国标准(BP16B.1部分(非无菌产品的细菌计数测试

0
    +关注 私聊
  • 会师楼

    第3楼2014/01/30

    非无菌产品有哪些

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...