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高效液相梯度洗脱应如何做？请各位高手帮忙(急!!!)

lin21zj

2006/04/14

液相色谱（LC）

我以前没有做过梯度洗脱的实验,现在我接了一个新实验是这样的流动相C为0.1%TFA,B为0.1%TFA乙腈水(80:20)
梯度是这样的:(流速为0.75ml/min)
time(min) B% C%
0 0.0 100.0
30.0 15.0 85.0
75.0 35.0 65.0
115.0 85.0 15.0
120.0 100.0 0.0
125.0 0 100.0
145.0 0 100.0
在梯度洗脱之前用什么来平衡柱子(C8),时间从125.0-145.0)这一段时间是不是在冲洗柱子?数据的采集应该是哪一段时间?一般做完实验后用哪一个流动相来冲洗柱子?请大家帮帮忙!谢谢了!

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zfr

第1楼2006/04/14

不知道你用的是哪家的HPLC ？
平衡柱子一般是用你的梯度程序的第一行，也就是 Initial 行，一般最后程序的一行与第一行相同，也就是在做完样品之后，在进下一针之前以初始状态再重新平衡系统
数据采集在系统平衡好，也就是基线走平之后开始
冲柱子所用的流动相要根据你所用的柱子和你的实验条件来决定

0

shgtj

第2楼2006/04/14

梯度洗脱之前用什么来平衡柱子(C8),时间从125.0-145.0)这一段时间是不是在冲洗柱子?数据的采集应该是哪一段时间?一般做完实验后用哪一个流动相来冲洗柱子?
洗脱之前用C125～145应该是洗柱子数据采集应该从0～145做完试验应该用C冲洗平衡柱子，没有试验了用甲醇冲洗。

0

free_siemens

第3楼2006/04/14

学习ing……

0

lin21zj

第4楼2006/04/17

谢谢大家!!

0

无为

第5楼2006/05/02

你这是什么检测方法呀,需要这么长的时间

0

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