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怎么挑选合适的制备分析柱子

厂商论坛

  • 各位,一直以来买填料,上面都有好几个参数,因为都买大众化的,所以一直也稀里糊涂的买,具体为什么买那种规格的,一点都不知道,所以想再这里请教下各位大虾,购买填料的时候该怎么选择:

    1、粒径
    粒径是买填料的时候必须的一个技术参数,这个有一定的理解,大概知道,粒径越低,分离度越好,但是相应的柱压越高。例如常规的来说,中压制备的填料一般是40-60微米,高压制备的一般是10-20微米,分析的一般是5微米,超高压分析的一般是3微米。可是,如果仪器硬件允许的情况下,是不是填料越细越好呢?

    2、孔径
    这个我就不懂了。只是知道一般情况下分析柱上面写的孔径都是100A的,好多制备的都是60A,而大分子的都是150A或者300A,这个是怎么选择的呢?有大虾给详细说明下不?

    3、键合
    对于制备填料或者分析填料,每个厂家都会给一个详细的型号,写的柱子的规格,比如博纳艾杰尔的柱子有XBP系列,有MP系列的,都针对哪些样品?为什么呢?是键合不同么?那么我们在挑选适合自己样品分离的时候,应该要询问或者了解些什么,怎么选择呢?

    拜求!!
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  • xiongbb

    第1楼2012/04/16

    首先粒径。粒径越小,装填的时候柱效越高,分离度会越好,但是并不是粒径越细越好,因为粒径越小抗污染能力会低,需要样品前处理过程越复杂,还是根据自己实验需要选择柱子就好。

    再说孔径,一般是和样品分子量有关系,正常分子量大于2000,就要选择150a以上的柱子。

    然后说键合,关于各个厂家的命名,一般会考虑基质,以硅胶为例,用的硅胶不同,命名就会不同。键合过程也会不同,以c18为例,有封尾和不封尾之分。选择色谱柱一般考虑,键合相,C含量,孔径,粒径,耐酸碱,是不是亲水,寿命,还有就是厂家和价格。尽量选择有键合能力的厂家,平行性会好一些。

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  • xiongbb

    第2楼2012/04/16

    柱子耐酸碱也是在硅胶表面做一些修饰,保护si-0h集团,就是为了不使柱流失。

    希望可以帮到你。

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  • yigaozizi

    第3楼2012/04/16

    据我了解:
    MP系列可以用于100%水相的流动相。
    XBP系列可以用于分析碱性物质,不会拖尾。
    都是键合C18,为什么会有这些区别,原因就在于键合基团的不同以及封尾与否。

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  • sally0326

    第4楼2012/04/16

    想问下,如果孔径选的不合适会咋样?小了如何,大了又如何?是不是小了就下不来了,大了就不保留呢?

    xiongbb(xiongbb) 发表:首先粒径。粒径越小,装填的时候柱效越高,分离度会越好,但是并不是粒径越细越好,因为粒径越小抗污染能力会低,需要样品前处理过程越复杂,还是根据自己实验需要选择柱子就好。

    再说孔径,一般是和样品分子量有关系,正常分子量大于2000,就要选择150a以上的柱子。

    然后说键合,关于各个厂家的命名,一般会考虑基质,以硅胶为例,用的硅胶不同,命名就会不同。键合过程也会不同,以c18为例,有封尾和不封尾之分。选择色谱柱一般考虑,键合相,C含量,孔径,粒径,耐酸碱,是不是亲水,寿命,还有就是厂家和价格。尽量选择有键合能力的厂家,平行性会好一些。

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  • xiongbb

    第5楼2012/04/16

    这俩区别大呢,硅胶基质不同,c含量不同,比表面积不同。

    yigaozizi(yigaozizi) 发表:据我了解:
    MP系列可以用于100%水相的流动相。
    XBP系列可以用于分析碱性物质,不会拖尾。
    都是键合C18,为什么会有这些区别,原因就在于键合基团的不同以及封尾与否。

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  • xiongbb

    第6楼2012/04/16

    孔径小了,样品进入不到孔内,活性基团也就接触不到样品,样品会随着每个硅胶粒之间的缝隙流出,导致前沿或者不保留;

    如果样品过大,也会导致色谱柱堵塞。

    孔径太大会导致峰谱带变宽,分离度降低。不过影响不是特别明显。

    sally0326(sally0326) 发表:想问下,如果孔径选的不合适会咋样?小了如何,大了又如何?是不是小了就下不来了,大了就不保留呢?

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  • yigaozizi

    第7楼2012/04/16

    原来如此,再请教个问题,他们的基质有什么不一样的呢?

    xiongbb(xiongbb) 发表:这俩区别大呢,硅胶基质不同,c含量不同,比表面积不同。

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  • yigaozizi

    第8楼2012/04/16

    样品分子结构过大会导致柱子的堵塞??那得是多大的分子呢?

    xiongbb(xiongbb) 发表:孔径小了,样品进入不到孔内,活性基团也就接触不到样品,样品会随着每个硅胶粒之间的缝隙流出,导致前沿或者不保留;

    如果样品过大,也会导致色谱柱堵塞。

    孔径太大会导致峰谱带变宽,分离度降低。不过影响不是特别明显。

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  • xiongbb

    第9楼2012/04/16

    我说错了,基质是一样的,都是硅胶,但是硅胶不一样。

    yigaozizi(yigaozizi) 发表:原来如此,再请教个问题,他们的基质有什么不一样的呢?

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  • xiongbb

    第10楼2012/04/16

    大到,类似于 盐析出的状态,比如一些蛋白分子变性,会聚集的样子。

    yigaozizi(yigaozizi) 发表:样品分子结构过大会导致柱子的堵塞??那得是多大的分子呢?

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