省部重点实验室
第10楼2012/05/08
手性柱第一次使用
若是正相模式下使用的手性柱的话,必须做的先遣工作是将液相系统从反相换成正相。具体可能的操作是这样的:
1. 若RP-HPLC用到过缓冲液的话,先换成纯水,按照C18柱使用维护方法,将普通色谱柱洗好,封柱。
2. 卸下常规反相C18柱后,直接用两通代替色谱柱将两部分管路连接起来,需用的2个通道都塞到水中,先用水洗去带走(可能用到的)缓冲液和乙腈(或者甲醇),然后同样地用异丙醇洗去带走水。最后再换上正相模式下的流动相(正己烷-异丙醇/乙醇)。
3. 接上手性柱,预设定一个分离条件,平衡色谱柱,平衡好后才进样分析。
动物组织或从土壤中提取的样品,这个做手性分析,前处理相当地相当地重要,尽可能地把不相关的基质去除,比如采用固相萃取、溶剂提取等来净化样品,然后用流动相或异丙醇/乙醇来溶解样品(溶解样品时,尽量采用流动相来溶解。chiral HPLC与RP-HPLC类似,也存在溶剂效应)。